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目的:研究色素沉着绒毛结节性滑膜炎(Pigmented Villonodular Synovitis,PVNS)患者滑膜细胞生物学特性及甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)对色素沉着绒毛结节性滑膜炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响,探讨甲氨蝶呤治疗色素沉着绒毛结节性滑膜炎的前景。方法:通过滑膜组织病理求证滑膜性质,胶原酶消化法分离色素沉着绒毛结节性滑膜炎病人滑膜细胞,用含10%胎牛血清的D-MEM培养液进行培养。培养一周后通过倒置相差显微镜和HE染色观察色素沉着绒毛结节性滑膜炎病人滑膜细胞形态学特性。滑膜细胞通过超微透射电镜进行鉴定。MTT法连续7天检测色素沉着绒毛结节性滑膜炎和骨性关节炎滑膜细胞增殖活力,采用第3代滑膜细胞观察药物的作用,实验分为4组:实验分成不同浓度的MTX药物处理组、未加药的空白对照组设MTX浓度为0μmol/L。体外培养的PVNS滑膜细胞空白对照组和MTX药物处理组加药后分别于48h、96h、144h用MTT比色法检测MTX对PVNS滑膜细胞增殖的抑制率,流式细胞仪检测MTX处理48h后对细胞凋亡的影响。结果:通过病理证实取材标本为色素沉着绒毛结节性滑膜炎滑膜组织,倒置显微镜下和HE观察发现色素沉着绒毛结节性滑膜炎滑膜细胞增殖速度较骨性关节炎滑膜细胞快,透射电镜鉴定本实验分离的滑膜细胞为PVNS滑膜细胞;MTT测定结果显示PVNS滑膜细胞体外培养其增殖活力明显高于骨性关节炎滑膜细胞(p＜0.05)。MTT的检测结果显示:与空白对照组相比,不同浓度的MTX均显著抑制PVNS滑膜细胞的增殖,(p＜0.05),且呈时效和量效关系;MTX体外作用PVNS滑膜细胞48h后可见凋亡细胞,MTX 0μmol/L组、0.5μmol/L组、1μmol/L组、2μmol/L组细胞凋亡率分别为6.34±2.05、6.87±3.34、7.45±2.19、8.79±2.59。中高浓度MTX药物处理组细胞凋亡率均与空白对照组有差异(p＜0.05),且与药物浓度成正相关。结论:色素沉着绒毛结节性滑膜炎滑膜细胞增殖速度快于骨性关节炎,色素沉着绒毛结节性滑膜炎可能存在滑膜细胞增殖过快或凋亡障碍。MTX可抑制PVNS滑膜细胞增殖,并可诱导PVNS滑膜细胞的凋亡。