昼夜节律是指以24小时为周期的节律,即“生物钟”,是生物界的基本节律。它通过调节生物体自身的生命活动以适应外界环境的昼夜变化,从而有利于生物的生存和物种的延续。目前研究发现至少有12个基因与昼夜节律控制有关。生物钟受节律基因、外界环境因素以及节律基因和外界环境因素间的相互作用控制。 目前认为,哺乳动物体内昼夜节律时钟的控制中心存在于前下丘脑视交叉上核(suprachiasmatic nuclei,SCN)中,SCN通过调节人的生理和行为过程控制人的睡眠—清醒节律、体温、激素水平、认知和记忆能力。目前研究发现外界光—暗信息可以通过眼睛及非视光感受系统传入SCN,引导出生物体的昼夜节律变化,但对后者仍存争议。新生儿期就已有昼夜节律系统的发育,并且对外界光照刺激有反应。 美乐托宁(melatonin,MT)是昼夜节律的生物调节因素之一,与睡眠、情绪、生殖、肿瘤的生长和衰老等有重要关系。新生儿中发现低水平的MT与早产、癫痫、神经行为发育延迟、婴儿猝死综合症等有关。光照可抑制它的分泌而黑暗可促进之。 光疗是目前治疗新生儿高胆红素血症的常用方法,蓝光是光疗的主要光源。光疗时患儿有哭吵、易激惹、腹泻等现象。光疗时虽然蒙住患儿的眼睛,但是浙江大学医学院博士学位论文外界光照刺激是否可以通过非视光感受系统影响新生儿的生物节律从而影响新生儿的行为或生命体征,如血压等尚未见报道。另外,血压在新生儿监护中起着非常重要的作用。我们以前的研究表明,正常足月新生儿生后即有血压的昼夜节律变化,表现为2时最低,6时和10时最高,14时略有下降,18时又略升高,22时又略下降。光疗时新生儿正常的血压节律是否有影响,也是我们希望探索的问题。 为此,本研究通过测定光疗前后新生儿外周血节律基因力及胭11和hcr.:lmRNA表达及血美乐托宁水平的变化,并且观察了光疗时新生儿血压节律的变化,探讨光疗对新生儿生物节律的影响及可能机制,为临床是否要采用符合新生儿生理节律的“节律光疗”提供依据。浙江大学医学院博士学位论文第一部分光疗对新生儿外周血节律基因表达和美乐托宁水平的影响厅必 探讨新生儿接受持续24小时光疗前后血力舀姚ZJ勺和力分vlmRNA表达及血美乐托宁水平的变化。 2003年9月一2004年5月间在浙江大学儿童医院住院的61名母乳性黄疽患儿作为研究对象,随机分为二组,一组为光疗组,有32名新生儿,另一组29名为对照组。所有的患儿均为因黄疽收住入院的足月儿,无窒息、感染及溶血性黄疽等疾病,入院前均母乳喂养。住院期间生命体征稳定,实验室检查除血胆红素水平升高外均正常。血清总胆红素水平在10一15mg/d1之间,直接胆红素水平在1.smg/d1以内,根据上述血清胆红素水平,患儿属可光疗或临床观察对象(参照《中华儿科杂志》2001年第三期“新生儿高胆红素血症干预方案”)。万君 1.光疗组在入院第二天予光疗24小时,从当天的10a.m.到次日的10 a.m.,光疗时患儿的眼和外生殖器均用黑布蒙住免受蓝光损害。对照组在入院第二天予蒙眼24小时,除头面部暴露外,其余部分均包被包裹。蒙眼持续时间和方法与光疗组一样。所有的患儿均在同一间病房内,晚上有灯光照明。光照强度在光疗组和对照组分别为5500一7200 Lux(506一055四/emZ)和72一55 Lux(10.55-12.45林w/cmZ)。 2.在新生儿光疗前后及蒙眼前后(约在10 a.m.左右)抽取外周血,分离血浆和外周血单个核细胞,总RNA抽提和反转录反应,构建质粒用于建立标准曲线,荧光定量PCR测定血斑赫2了了和h分ylmRNA表达, 3.MT测定用EIJISA方法测定血M飞’水平。浙江大学医学院博士学位论文绒英 1.节律基因mRNA的表达 光疗组:力及翻11在光疗后表达低于光疗前(玄生一2,880,厂0,004);力分叮在光疗后表达高于光疗前(子2.618,P=0.009). 对照组:两个基因的表达在蒙眼前后均无改变幼度姚灵了I:矛0.205,厂0.837,力分刀:矛0 .573,P=O.567). 光疗组光疗前和对照组蒙眼前两个基因表达的基础值也无差异,班派至了1:子0.231,P=0.817,h分厂1:子0.881,厂0. 378。 2.血MT水平的变化 光疗组:血MT水平在光疗后低于光疗前子一2.328,P=O.02。 对照组:血MT水平在蒙眼前后无改变矛0.091,厂0.927。 光疗组光疗前和对照组蒙眼前血MT水平的基础值也无差异矛1.141,P=0.254。浙江大学医学院博士学位论文第二部分光疗对新生儿血压节律的影响刀劣探讨新生儿接受持续24小时光疗时血压节律的变化。 2003年9月一2004年5月间在浙江大学儿童医院住院的138名黄疽患儿作为研究对象,随机分为二组,一组为光疗组,有71名新生儿,另一组67名为对照组。所有的患儿均单纯因黄疽收住入院的足月儿。住院期间生命体征稳定,血清总胆红素水平在10一1 smg/dl之间,直接胆红素水平在1.smg/dl以内,根据上述血清胆红素水平,患儿属可光疗或临床观察对象(参照《中华儿科杂志》2001第三期“新生儿高胆红素血症干预方案”)。方岔 1.光疗组在入院第二天予光疗24小时,对照组在入院第二天予蒙眼24小时,方法同第一部分。 2.在新生儿光疗时及蒙眼时每4小时用Dinamap翔血压仪测量一次血压,即14时,18时,