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背景和目的：压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)是中老年妇女常见慢性病,是指在腹压增加时,出现不自主的尿液自尿道外口溢出。SUI的病因很复杂,年龄是其发病的主要诱因之一,但是发病机制迄今未明,最经典的“整体理论”和“吊床假说”均强调尿道支撑结构薄弱导致SUI的发生。尿道支撑结构由大量细胞外基质(extracellular matrix, ECM)和少量成纤维细胞等组成。有研究表明ECM重构障碍是SUI发病的关键因素,而雌激素直接参与了ECM的重构过程。水通道蛋白(Aquaporins AQPs)是选择性高效转运水分子的通道,同时还广泛参与人体细胞的迁移运动,与多种组织的损伤修复有关,而且有研究发现在水通道蛋白2(Aquaporin2,AQP2)的基因上存在雌激素的反应元件,证实了雌激素能直接调控AQP2的基因转录而调节其在子宫内膜细胞上的表达,从而促进内膜细胞的迁移、入侵、粘附及增殖。本研究拟通过原代培养获得女性尿道支撑组织成纤维细胞,采用免疫荧光技术证实AQP2在尿道支撑组织成纤维细胞上的表达,采用Western blot法观测绝经前后SUI患者与非SUI患者尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达差异,探讨AQP2在SUI发生发展中的作用；同时,通过测定血清雌二醇(estradiol,E2)水平,探讨尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达水平与血清E2水平的相关性。方法：收集浙江大学医学院附属妇产科医院2013年1月至2014年3月收治的18例SUI患者(SUI组)和18例非压力性尿失禁妇女(对照组)的阴道前壁组织(即尿道支撑组织),每组再分为绝经前后两组各9例,所有组织标本来源于SUI患者行抗尿失禁手术时和非SUI患者因尿道旁腺囊肿、尿道憩室、尿道附近阴道壁囊肿等疾病手术时,取材于尿道附近约0.5×1cm2的阴道前壁全层组织。取组织块进行成纤维细胞原代培养,并予免疫组化鉴定。采用免疫荧光法测定成纤维细胞上AQPs各亚型的表达,采用Western blot法检测成纤维细胞上AQP2蛋白表达水平,比较绝经前后SUI组和非SUI组之间尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2蛋白表达水平的差异。所有36例入选对象均在外科手术前一天早晨7时空腹采静脉血2ml,采用电化学发光免疫检测(ECLIA)法检测血清E2水平,采用Pearson相关性分析法探讨尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2蛋白表达水平与血清E2水平之间的相关性。结果：1.免疫荧光技术和Western blot法均发现女性尿道支撑组织成纤维细胞上有AQP2的表达；2.经t检验,绝经前后SUI组和对照组的年龄、分娩次数、体重指数以及绝经后SUI组和对照组的绝经年限差异均无统计学意义；绝经前血清E2水平SUI组(311.43±93.63nmol/L)显著低于对照组(530.30±232.21nmol/L)(P<0.05).绝经后血清E2水平SUI组为39.91±16.76nmol/L,对照组为31.30±9.95nmol/L两组之间差异无统计学意义(P>0.05)；经相关性分析,血清E2水平与所有标本尿道支撑组织成纤维细胞(r=—0.537,P<0.05)及总的SUI组标本尿道支撑组织成纤维细胞(r=—0.860,P<0.05)上AQP2的表达水平均存在显著的负相关,而与总的对照组标本尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达水平无显著相关(P>0.05)。3.经Western blot法检测,绝经前后SUI组及绝经前后对照组尿道支撑组织成纤维细胞上均有AQP2的表达,总的SUI组和总的对照组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的蛋白表达水平分别为26.29±2.53和25.32±3.80,t检验显示两组间差异无统计学意义(P>0.05)；总的绝经前组和总的绝经后组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的蛋白表达水平分别为23.25±2.40和28.36±1.31,经t检验,总的绝经后组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达明显升高(P<0.05)绝经前SUI组和绝经后SUI组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的蛋白表达水平分别为24.03±0.98和28.54±1.11,绝经前对照组和绝经后对照组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的蛋白表达水平分别为22.46±3.15和28.19+1.54,经t检验,绝经前SUI组与绝经前对照组、绝经后SUI组与绝经后对照组上的表达差异均无统计学意义(P均>0.05)；绝经后SUI组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达较绝经前SUI组上的表达明显升高,两组间的比较差异有统计学意义(P<0.05)；绝经后对照组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达较绝经前对照组上的表达亦明显升高,两组间的比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1.女性尿道支撑组织成纤维细胞上存在AQP2的表达；2.AQP2的表达与雌激素水平密切相关,绝经后SUI组尿道支撑组织成纤维细胞上AQP2的表达较绝经前SUI组上的表达明显升高,可能是绝经后尿道支撑组织成纤维细胞上低雌激素水平上调AQP2的表达所致。