HCV是引起丙型肝炎的病原体。70%以上患者可转变成慢性肝炎，其中约25%的慢性丙肝病人可转变成肝硬化或肝癌。目前还没有理想的治疗药物，研究和发展有效的疫苗用以预防HCV感染是一个迫切需要解决的问题。HCV的E2包膜糖蛋白一直是国际上HCV疫苗研究的重点目标。我们以前的研究已证实E2DNA疫苗能够诱导动物的体液免疫。能否有效地诱导产生中和性保护抗体和诱导细胞免疫，产生特异性CTL反应以清除体内病毒，是评价疫苗的重要指标。本论文研究HCVE2工程蛋白诱导的CTL反应。
　　为了获得E2工程蛋白，我们应用PCR技术从HCV基因组cDNA克隆质粒中扩增获得不同长度的E2基因序列，构建了两个重组真核表达质粒：pCE2-1(422-661)，pCE2-2(383-661)和两个重组原核表达质粒：pQE2(417-661)，pET-HIS-E2(417-750)，分别在猴肾细胞COS-7和工程菌株JM109、BL21中表达，我们发现，以上的所有质粒，在对应宿主中，都表达产生了E2蛋白，Westem-blot结果充分地证明表达出的E2蛋白能与E2单克隆抗体特异性反应。但表达水平不高，如何提高E2的表达水平有待进一步解决。
　　JM109pQ-E2菌株诱导培养5-6小时后，收集细胞用超声波振荡裂解，用Ni-NTA-Superflow亲和层析柱从裂解液中提取和纯化E2蛋白作为抗原。抗原用脂质体包被，采用腹腔、皮下、肌肉注射的方式，在盐酸普鲁卡因及淀粉的辅助作用下，免疫BALB/c鼠后取鼠脾脏制备淋巴细胞，用IL-2、Con-A、PHA及肽段定向刺激扩增后做为效应细胞，与经过重组真核表达质粒pCE2转染的P815细胞(靶细胞)发生作用，利用LDH释放试验检测作用效果。在效应细胞与靶细胞的细胞数之比为200∶1的情况下，三种免疫方式免疫小鼠的脾细胞对靶细胞的杀伤率都超过30%。这些结果表明工程菌株表达的HCVE2蛋白可以诱发免疫实验动物机体产生特异性CTL应答。由此我们认为E2蛋白是发展HCV预防工程蛋白疫苗的合适候选者。