地衣芽孢杆菌B.licheniformis29质粒pBL29性质的研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wumingshan2009
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本文采用改良碱裂解法对30株益生芽孢杆菌进行质粒抽提,仅从一株地衣芽孢杆菌B.licheniformis29菌株中抽提得到质粒pBL29,纯化后通过琼脂糖凝胶电泳观察,确证质粒pBL29为闭合环状质粒、分子量3.7Kb左右。在药敏试验中发现B.lichenformis29菌株具有卡那霉素抗性,用吖啶橙消除试验和十二烷基磺酸钠消除试验以及原生质体转化试验,证明卡那霉素抗性基因是质粒而不是染色体编码。酶切分析进一步证明质粒pBL29有大量的单酶切位点,如EcoRⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、BglⅡ、PstⅠ、XbaⅠ、BamHI等。同时根据限制性酶切各片段的分子量作出了质粒pBL29的内切酶图谱。并对质粒pBL29进行测序和分析,证明了质粒pBL29大小为3711bp,具有大量的单酶切位点、编码卡那霉素抗性基因以及富含A/T序列的复制起点。
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