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蛹虫草是一种和冬虫夏草同属异种的药食兼用真菌,其主要药用成分与冬虫夏草相同,具有调节免疫、抑制肿瘤、延缓衰老等作用。蛹虫草子座中分离得到的蛹虫草多肽具有抗菌、抗癌和免疫增强作用。本文以蛹虫草子座热水浸提虫草素后的剩余物(以下简称HWM剩余物)为原料,研究了蛹虫草多肽的制备、分离纯化工艺以及其抗氧化能力等,旨在为蛹虫草多肽的开发利用提供参考。主要结果如下:1.确定了不经蛋白提取过程,直接对原料进行酶解的工艺。蛹虫草HWM剩余物蛋白质提取试验中,当碱液浓度为0.15mg/mL时蛋白质提取率仅为3.17%,蛋白质提取率偏低,且采用碱法提取蛋白工艺繁琐,加大了成本投入,所以本试验省略蛋白提取过程而直接对蛹虫草HWM剩余物进行酶解,更有利于蛹虫草的综合利用;2.以蛹虫草HWM剩余物水解率和酶解液多肽指数TCA-SN%为指标,采用单酶酶解、双酶酶解、辅助酶解的方法,研究了胃蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、蜗牛酶、纤维素酶对蛹虫草HWM剩余物的酶解效果。结果表明,碱性蛋白酶是酶解蛹虫草HWM剩余物的最佳蛋白酶,采用该酶对蛹虫草HWM剩余物进行酶解,所得酶解液多肽指数最高,为53.60%;3.通过建立数学模型,研究了底物质量浓度、初始pH值、反应温度、加酶量以及反应时间对蛹虫草HWM剩余物酶解效果的影响规律,优化了蛹虫草HWM剩余物的酶解工艺条件。结果表明,酶解蛹虫草HWM剩余物的最佳工艺参数为:pH12.0,温度55℃,加酶量5.12%,底物质量浓度70mg/mL,反应时间12h,在此条件下,蛹虫草酶解液多肽指数达到90.32%;4.利用葡聚糖凝胶层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛹虫草多肽进行了初步分离纯化,分析了蛹虫草多肽的分子量分布范围。电泳结果表明,酶解法制备的蛹虫草多肽分子量主要集中分布在31805620Da附近;凝胶层析结果表明,蛹虫草HWM剩余物酶解液中多肽分子量在15806680Da之间的占31.00%,在3721446Da之间的占6.85%。5.采用体外化学模拟体系,测定了蛹虫草多肽的DPPH-自由基清除能力、超氧阴离子自由基(O2-)清除能力、羟自由基(-OH)清除能力和还原能力。当蛹虫草多肽浓度为1.0mg/mL时,其DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基(O2-)抑制率和羟自由基(-OH)清除率分别为51.25%、38.35%和40.09%,说明碱性蛋白酶酶解法制备的蛹虫草多肽具有一定的清除自由基、抗脂质过氧化的能力。6.采用平板滤纸片法考察了蛹虫草多肽的抑菌活性。试验结果显示,蛹虫草多肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沙门氏杆菌的抑菌结果均为阴性,表明碱性蛋白酶酶解法制备的蛹虫草多肽对上述五种菌没有抑菌活性。