大白菜(Brassica campestris ssp.pekinensis)是我国重要的蔬菜,由于其营养丰富,产量高、价格低廉以及耐贮藏,深受广大消费着的喜爱。而山西省农业科学院蔬菜研究在大白菜育种方面一直处于国内的前列,每年大白菜种子销售额基本稳定在300万元人民币以上。但是近年来,随着环境恶化的加剧,温室效应的影响,大白菜的病虫害也日益严重,致使生产中试用过量的农药,即污染了环境,又影响了人们的身心健康,由于在已有的种质资源中很难找到可利用的抗虫、抗病材料,是得大白菜的常规抗病虫育种受到了限制。培育具有良好的抗病抗虫的大白菜新品种迫在眉睫,鉴于此,我们利用该所丰富的大白菜种质资源,利用生物技术—转基因技术同传统育种结合起来进行大白菜的品种改良越来越重要。利用基因工程技术培育抗虫抗病新品种是将来农业发展的一个重要方向,与传统病虫害防治技术相比,基因工程不仅具有选择性强、使用安全、投资少和见效快的优点,而且对于植物的保护具有连续性、和全面性。 高效而稳定的遗传转化体系的建立是获得转基因大白菜的前提。本研究以现在全国大面积推广的大白菜品种的8个亲本材料,筛选出5个易于再生的亲本材料,建立了两套大白菜遗传转化体系—无菌苗子叶再生体系和原生质体再生体系,并优化了不同激素种类和组合,及不同的添加物、不同基因型、不同苗龄、不同外植体类型、预培养与否、菌液浓度、浸染时间、共培养与否、羧苄青霉素浓度、卡那霉素浓度和酚类化合物等各种条件。初步建立了一套大白菜子叶、原生质体高效稳定的遗传转化体系,根据其再生频率高低,其再生频率的次序由大到小依次为青麻叶C、青麻叶D、河头早A、河头早B和石特11-3。本研究还对酚类化合物对大白菜转化频率的影响进行了较为深入的研究,证实培养基中添加200μM的乙酰丁香酮转化率最高,可达16.9%;其次为阿魏酸,可达16%,可作为乙酰丁香酮的替代品;