甜菜根腐病拮抗菌的筛选、鉴定与抑病效果研究

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甜菜根腐病是一种危害极大的土传病害,发病原因较为复杂,利用拮抗菌对其进行防治有广阔前景。本研究从根腐病区甜菜块根和根际土壤筛选甜菜根腐病拮抗菌,并对筛选出的拮抗菌株进行鉴定,探索拮抗菌对致病菌的拮抗作用及对甜菜根腐病的防治效果。通过平板对峙试验筛选出拮抗菌株,并对拮抗菌生长条件进行了初步研究,通过形态观察、分子鉴定和生理生化实验对筛选出的拮抗菌进行鉴定,通过室内及大田的抑病试验验证了拮抗菌菌液对甜菜根腐病的防治效果。本研究在减轻甜菜根腐病危害、保障农产品安全生产、减轻农药残留等方面具有重要意义。具体研究结果如下:1.分离、筛选出13株疑似甜菜根腐病致病菌,对这13株致病菌进行致病性检验后,其中有3株致病性较高(BY-10、BY-11和BY-13);对这3株具有较高甜菜根腐病致病性的真菌进行了形态鉴定和分子鉴定,结果表明:BY-10和BY-13为茄病镰刀菌(Fusarium solani),BY-11为离生青霉(Penicillium solitum)。2.分离、筛选出37株差异菌株,经平板对峙试验,筛选3株对甜菜根腐病致病菌具有拮抗作用的拮抗菌(Y-2,Y-12和Y-14),对这3株拮抗菌进行了形态鉴定、分子鉴定,并对其中的细菌进行了生理生化实验,结果表明:Y-2为小巢状曲霉(Emericella nidulans),Y-12为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),Y-14为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。3.初步研究了3株拮抗菌的生长和营养特性,结果表明:Y-2是兼性厌氧菌,最适生长条件为28℃、pH8.0、130r/min,最佳碳氮源分别为可溶性淀粉和酵母粉;Y-12是兼性厌氧菌,最适生长条件为32℃、pH6.0、130r/min,最佳碳氮源分别为蔗糖和酵母粉;Y-14是兼性厌氧菌,最适生长条件为32℃、pH7.0、130r/min,最佳碳氮源分别为麦芽糖和牛肉膏;对Y-12和Y-14的摇瓶发酵生长曲线进行了测定,结果表明:在LB液体培养基中,Y-12在0-8h时处于延滞期,在8h-16h时处于对数生长期,在16h后进入稳定期;拮抗菌Y-14在0-2h时处于延滞期,在2h-14h处于对数生长期,在14h后进入稳定期。4.室内及大田的抑病试验结果表明,筛选得到的3株拮抗菌菌液对甜菜出苗率没有影响,可有效防治甜菜根腐病的发生。
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