莪术醇对膀胱癌细胞增殖和凋亡及EZH2表达的影响

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目的:我们前期研究证实EZH2基因在膀胱癌组织中高表达,在膀胱癌进展中有着重要的作用,而通过文献可知莪术醇能够对多种肿瘤的生长产生影响。因此通过体外实验研究莪术醇对两种人膀胱癌细胞系(EJ、T24)生长的影响,以及是否对这两种细胞系中EZH2的表达产生影响,初步探讨莪术醇在膀胱癌中可能的作用机制。方法:用不同浓度莪术醇(0、12.5、25、50、100mg/L)干预处理人膀胱癌EJ和T24细胞。1.使用CCK-8法检测莪术醇对EJ和T24细胞增殖抑制作用;2.通过克隆形成实验检测莪术醇对两种细胞克隆形成能力的影响;3.通过流式细胞术PI染色法测定莪术醇对EJ和T24细胞凋亡的影响;4.q RT-PCR法分析莪术醇对两种细胞中EZH2m RNA表达的影响;5.Western blot法检测两种细胞中EZH2蛋白的表达情况。结果:1.CCK-8法结果表明,莪术醇对两种膀胱癌细胞的增殖有明显的抑制作用,并且该作用随着药物浓度增加和孵育时间延长而增强。2.克隆形成实验结果表明,莪术醇处理组与对照组相比,细胞克隆形成能力下降,细胞增殖受到抑制。3.流式细胞术检测细胞凋亡率,结果显示膀胱癌EJ细胞凋亡率分别为:(0.50±0.05)%、(3.60±0.60)%、(6.20±1.00)%、(16.50±1.50)%、(29.00±2.15)%;T24细胞凋亡率为(2.40±0.10)%、(4.93±0.15)%、(6.03±0.15)%、(13.50±0.89)%、(25.80±0.66)%;莪术醇处理组EJ和T24细胞凋亡率与对照组相比均增加,并且随着莪术醇浓度增加其细胞凋亡率也逐渐增加,存在一定的浓度依赖性。4.q RT-PCR和Western blot法结果均显示莪术醇对膀胱癌EJ和T24细胞中EZH2基因的表达有明显抑制作用。结论:莪术醇对膀胱癌EJ和T24细胞有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制可能与下调细胞中EZH2基因表达有关。
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