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实验一靶向STAT3的RNA干扰对人胃癌细胞增殖的影响目的:观察瞬时转染特异性siRNA后对人胃癌SGC-7901 STAT3的表达,探讨RNA干扰STAT3对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:以人胃癌细胞系SGC-7901为研究对象,培养瞬时转染特异性siRNA,0、24、48、72小时后用MTT法检测siRNA组、阴性对照组与空白对照组的增殖活性,48小时后流式细胞仪分析三组细胞周期分布与凋亡的变化,RT-PCR检测三组细胞STAT3 mRNA表达水平。结果:siRNA组与两对照组相比细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.01);细胞生长明显减缓,G0-G1期细胞比例增加(P<0.01);siRNA组较空白对照组mRNA下降了73.04 %(P<0.01);阴性对照组与空白对照组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:沉默STAT3基因可有效控制胃癌细胞的增殖,使癌细胞阻滞于G0-G1期并诱导其凋亡,可望成为胃癌治疗的新方法。实验二靶向STAT3的RNA干扰对人胃癌细胞侵袭的影响目的:探讨RNA干扰STAT3对人胃癌细胞侵袭的影响方法:以人胃癌细胞株SGC-7901为研究对象,培养后瞬时转染特异性的siRNA,转染48小时后用RT-PCR检测siRNA组、阴性对照组与空白对照组MMP-9 mRNA表达水平,免疫组化法检测三组MMP-9的蛋白表达,Transwell体外侵袭实验进行癌细胞体外侵袭力分析。结果:siRNA组与两对照组相比对胃癌细胞MMP-9 mRNA有明显的抑制作用,MMP-9蛋白表达显著下降(P<0.01);侵袭实验siRNA组较空白对照组侵袭力下降了45.26%,两者差异有显著性(P<0.01),而两对照组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:(1)采用靶向STAT3的RNA干扰研究沉默STAT3基因对人胃癌细胞侵袭力的影响,国内尚未见报道;(2)沉默胃癌STAT3可有效抑制MMP-9 mRNA的表达,MMP-9蛋白水平下降,肿瘤细胞侵袭能力明显降低;(3)沉默STAT3基因抑制胃癌细胞侵袭能力的机制之一可能是通过下调MMP-9途径。