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目的:本研究旨在探讨可溶性CD40配体(sCD40L)对白血病HL-60细胞株生物学行为的作用及其机制,为rhsCD40L应用于白血病的临床治疗提供一定的基础理论依据。方法:1)采用MTT法检测不同浓度sCD40L对白血病HL-60细胞体外增殖的影响,以确定最佳干预浓度;2)采用MTT法检测不同培育时间内sCD40L对白血病HL-60细胞体外增殖的影响;3) Annexin V荧光标记法检测细胞凋亡;4)流式细胞术测定不同培育时期内CD95、Bcl-2凋亡相关因子的水平;5)ELISA测定白血病细胞培养上清液中与sCD40L不同培育时期内细胞因子IL-6水平的变化。结果:1)不同浓度sCD40L对HL-60细胞作用48 h后有不同程度的增殖抑制作用,与三氧化二砷(As2O30)阳性组及HL-60阴性对照组比较,均有显著差异(P<0.05)。其中以2.00μg/ml、4.00μg/ml对白血病HL-60细胞的生长抑制作用最为明显。2)MTT法测定sCD40L 2.00 gg/ml组、4.00μg/ml组、As203组、HL-60细胞对照组的OD值分别为1.290±0.006、0.568±0.012、0.799±0.013、2.154±0.004,组间相互比较均有显著差异(P<0.05),其中以(?)sCD40L 4.00μg/ml组(?)OD值最低。3)Annexin V-FITC/PI双染色显示,HL-60细胞与sCD40L组共育后,均见明显凋亡,其中以sCD40L 4.00μg/ml组作用48 h的凋亡现象最为显著(凋亡率>20%),与As203组及HL-60细胞组比较均有显著差异(P<0.01)。4)流式细胞术测定各组CD95、Bcl-2的表达均有显著差异(P<0.05),CD95的表达在sCD40L 4.00μg/ml 48h时上调最为显著(P<0.05),Bcl-2的表达在sCD40L 4.00μg/ml 48 h时下调最为显著(P<0.05)。5)ELISA法检测不同组培养HL-60细胞上清中IL-6的水平,以48h sCD40L 4.00μg/ml组(?)IL-6水平最低(P<0.05),其次是As203组,并且没有浓度时间依赖性(P>0.05)。结论:1)sCD40L在体外能够明显抑制HL-60细胞增殖,诱导HL-60细胞发生凋亡,本研究表明sCD40L最佳干预浓度为4.00μg/ml,最佳作用时间为48 h,提示sCD40L作用具有浓度和时间依赖性;2)sCD40L抗白血病作用,诱导HL-60细胞凋亡可能是通过死亡受体途径和线粒体信号途径两条途经完成的;3)sCD40L在体外抑制HL-60细胞的增殖可能是与调节IL-6的表达水平有关。