Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米颗粒的制备及分析

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lllwan1
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目的:Ang2体系广泛表达于人类肿瘤的血管系统重构中,而在正常组织无明显表达,使它成为一个在抗血管生成的癌症治疗中有吸引力的候选靶目标。我们前期已成功构建了Ang2-siRNA重组质粒,用其转染HUVECs可抑制Ang2的表达,构建了Ang2-siRNA慢病毒表达载体,用其感染恶性黑色素移植瘤可抑制血管的生成、生长。本课题在前期研究的基础上,制备Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒,检测壳聚糖磁性纳米微粒的理化性质,Ang2-siRNA质粒与壳聚糖磁性纳米微粒的结合情况,为下一步Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒靶向治疗恶性黑色素瘤的体内、外实验提供实验材料。方法:1、利用化学共沉淀法制备Fe3O4纳米粒子。2、利用乳化交联法制备壳聚糖磁性纳米微粒。3、使用透射电镜观察壳聚糖磁性纳米微粒的物理形态。4、使用激光粒径检测仪检测壳聚糖磁性纳米微粒的粒径分布。5、进行壳聚糖磁性纳米微粒的沉淀实验。6、Ang2-siRNA质粒表达载体与壳聚糖磁性纳米微粒的结合分析。结果:1、制备的磁性Fe3O4纳米粒子肉眼观察下呈黑褐色颗粒状粉末,具有良好的磁响应性。2、制备的壳聚糖磁性纳米微粒可以很好的分散于蒸馏水中,为黑褐色悬液,并具有良好的磁响应性,透射电镜示颗粒以椭圆形和球形居多,另有少许不规则形,边界明显,微粒大小多为70nm左右,激光粒径检测仪显示该样品的微粒其粒径范围为55.2~82.5nm,平均粒径为67nm,且粒径分布较窄。3、磁性壳聚糖纳米微粒可以在外加磁场作用下在液体中定向移动。4、成功制备Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒。结论:成功的制备出粒径小、粒径分布范围窄的Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒,并且壳聚糖磁性纳米微粒可与Ang2-siRNA质粒表达载体很好的结合,为下一步进行Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒靶向治疗恶性黑色素瘤的体内外实验提供实验材料。
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