【摘 要】
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为了在体外探讨HLA-G的免疫学功能,研究其能否诱导免疫耐受及其机制,该文采用RT-PCR方法,从人滋养层细胞来源的JEG-3细胞中,克隆出HLA-G1 cDNA,构建测序载体,经 酶切及测序证
【出 处】
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上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学
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为了在体外探讨HLA-G的免疫学功能,研究其能否诱导免疫耐受及其机制,该文采用RT-PCR方法,从人滋养层细胞来源的JEG-3细胞中,克隆出HLA-G1 cDNA,构建测序载体,经 酶切及测序证实扩增序列.构建重组逆转录病毒载体并包装居病毒,转染不表达HLAI类分子的K562细胞.在获得稳定表达HLA-G分子的K562细胞的基础上,观察4h及16h不同效靶比例时,NK细胞对该靶细胞的杀伤效应.结果显示,NK细胞对转染HLA-G的靶细胞的杀伤作用较未 转染组明显降低.用W6/32或BFL.1单抗阻断HLA-G分子,可以恢复NK细胞的杀伤活性.为了 探讨HLA-G能否诱导T细胞耐受及其机制,首先用丝裂霉素处理的HLA-G阳性的JEG-3细胞作为刺激细胞,健康人外周血淋巴细胞作为反应细胞,观察淋巴细胞的增殖反应,发现JEG-3细 胞不能刺激淋巴细胞的增殖.用转染HLA-G分子的K562细胞丝裂霉素处理后作为抑制细胞, 采用经典的混合淋巴细胞培养检测HLA-G1分子调节T淋巴细胞增殖的能力.
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