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帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是一种常见于中老年的神经系统变性疾病,其主要病理变化是含色素的神经元变性、缺失,尤以黑质致密部多巴胺(dopamine, DA)能神经元缺失为主。当黑质DA能神经元减少50%以上,纹状体DA递质减少超过80%时,出现以进行性加重的运动缓慢、肌强直、静止性震颤、姿势步态异常、表情减少为特征的临床表现。PD的病因至今仍不十分清楚,但越来越多的研究支持环境、老龄和遗传因素与PD发病相关。接触农用化学品,尤其是杀虫剂一直被认为是诱导PD发病的危险因素之一。MPTP,一种非法海洛因混合物的副产物,可诱导PD症状的产生,这一结论使对PD环境因素的研究备受关注。目前,已有报道证实多种杀虫剂在动物模型中可诱导DA能神经元的损伤。百草枯(paraquat, PQ)与MPTP活性代谢产物MPP+结构的相似性使人们推测PQ可能是一种DA能的神经毒剂。也有报道认为接触代森锰(maneb, MB),一种广泛使用的杀菌剂,可诱发PD症状。此外,除了单独使用MB对DA能神经元具有毒性外,重复全身性给予小鼠MB和PQ的混合物可导致纹状体DA含量减少,黑质DA能神经元的变性及动物行为异常,两者具有协同作用[5]。现行的PD治疗方法不能阻止黑质神经元进行性死亡和PD病理发展。因此,探索中医药保护黑质DA能神经元的新方法,对于完善PD治疗十分必要。二苯乙烯苷(2,3,5,4-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside, TSG)是何首乌的主要成分。近年来,TSG的神经保护作用逐渐受到人们的关注。研究证实TSG可改善老年痴呆小鼠的学习记忆能力并能有效清除自由基,具有神经保护作用,但是TSG对PQ-MB诱导的DA能神经元是否有保护作用,国内外尚未见报道。本研究选择PQ-MB建立PD模型,旨在观察TSG对DA能神经元损伤是否具有保护作用,并对其有关作用机制做初步探讨。实验内容如下:实验一目的:探讨TSG对PQ-MB诱导小鼠黑质DA能神经元凋亡的保护作用。方法:酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学法、尼氏(Nissl)染色。结果:空白对照组Nissl阳性神经元及TH阳性神经元分别为287.3±7.3、117.5±9.3。TSG组的Nissl阳性神经元及TH阳性神经元脱失减少,与模型组(104.1±9.6%)相比,Nissl阳性神经元分别上升为113.4±7.4 (P>0.05)、174.7±6.6 (P<0.05)、266.2±10.2 (P<0.01);与模型组(51.7±8.2)相比,TH阳性细胞数分别上升为63.8±6.1 (P>0.05)、75.4±5.6 (P<0.05)、109.3±7.6 (P<0.01)。结论:TSG可抑制PQ-MB诱导的小鼠黑质DA能神经元凋亡。实验二目的:探讨TSG对PQ-MB诱导黑质DA能神经元凋亡保护作用的相关机制。方法:免疫组织化学染色检测Caspase-3的表达。结果:模型组(42.5±5.2%)与空白对照组(9.9±7.2%)相比,Caspase-3阳性细胞比例明显增加(P<0.01),而这种激活可被TSG所抑制。与模型组相比,TSG组(40、80、160mg/kg) Caspase-3阳性细胞比例分别降至26.3±6.1% (P<0.05)、18.7±4.9 %(P<0.05)、15.4±5.8% (P<0.01)。结论:TSG对PQ-MB诱导的黑质DA能神经元凋亡具有保护作用,机制可能与其抑制Caspase-3激活有关。