不同肾上腺素能受体阻滞剂对钙调磷酸酶在心肌凋亡中作用的影响

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第一部分钙调磷酸酶在离体大鼠缺血再灌注及肾上腺素能受体介导心肌凋亡中的作用目的研究钙调磷酸酶(Calcineurin,CaN)在缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)及异丙肾上腺素(Isoproterenol,Iso)致心肌凋亡时的作用。方法采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术,制备不同时间缺血/再灌注(I/R)和/或不同剂量异丙基肾上腺素(Iso)所致心肌损伤模型,在此基础上给予钙调磷酸酶抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,CsA),观察心肌细胞凋亡率的变化及钙调磷酸酶(CaN)的表达,由原位末端标记染色法(TdT-mediated dUTP nick end labeling ,TUNEL)确定心肌细胞凋亡,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率的变化,RT-PCR法检测CaN mRNA水平。结果单纯Iso在一定剂量时可致心肌细胞凋亡,并可增加I/R所诱导的心肌细胞凋亡率,CaN mRNA水平随之增加,CaN抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,CsA)可降低I/R和Iso共同作用所诱导的心肌细胞凋亡率。结论一定剂量的异丙肾上腺素可促进I/R诱导的心肌细胞凋亡,并且伴随CaN表达的增加,CaN抑制剂CsA可降低I/R和Iso共同作用所诱导的心肌细胞凋亡,说明CaN参与了心肌细胞凋亡,有促进细胞凋亡的作用。第二部分不同肾上腺素能受体阻滞剂对钙调磷酸酶在心肌凋亡中作用的影响目的研究不同选择性的β-肾上腺素能受体阻滞剂对缺血/再灌注(I/R)及异丙肾上腺素(Iso)致心肌凋亡时心肌细胞凋亡率的影响及其对钙调磷酸酶(CaN)的调节作用。方法采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术制备I/R+Iso所致离体心脏损伤模型,在损伤模型基础上给予不同选择性的β-肾上腺素能受体阻滞剂(阿替洛尔、卡维地洛)进行干预,观察不同药物对心肌细胞凋亡率及CaN mRNA表达的影响,用TUNEL法确定心肌细胞凋亡,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR法检测CaNmRNA水平。结果采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术制备的I/R+Iso所致心肌损伤模型,经卡维地洛干预后,心肌细胞凋亡率和CaN mRNA水平与干预前比较均降低(P<0.05),二者变化趋势呈正相关;经阿替洛尔干预后,心肌细胞凋亡率和CaN mRNA水平与干预前比较无统计学差异(P>0.05)。结论非选择性(α1、β)肾上腺素能受体阻滞剂卡维地洛可通过调节CaN的表达来
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