反相-高效液相色谱(Reversed phase high performance liquid chromatography，RP-HPLC)是由极性的流动相和非极性的固定相所组成的液相色谱系统，恰与正相液相色谱相反。十八烷基键合硅胶是RP-HPLC的典型的固定相，甲醇和乙腈是RP-HPLC的典型的流动相。在当今液相色谱领域中RP-HPLC是主要的分离方式，几乎能够用于所有可溶于极性溶剂或者是弱极性溶剂中的有机化合物的分离分析。反相液相色谱法可用于分离非极性，极性或者离子型化合物，大部分的分析任务均由反相色谱法完成。RP-HPLC因其强大的分离分析能力，而被广泛应用于众多研究领域的一种有效分离方法，如化学、毒物学、生物学、临床医学、食品及环境等。该方法也是分析化学领域中发展较为迅速，应用较广的方法之一，由于实际样品中待测成分含量不足，或者因待测成分本身性质以及高效液相色谱的制约，并不是所有的化合物都可直接用于色谱分析，因此，开发高灵敏度的分析检测方法具有重要意义。高效液相色谱法与化学衍生化法相结合对于环境与生物中的大多数物质，均可满足痕量分析。开发的新型衍生试剂及其在高效液相色谱领域的应用研究，一直以来，都是高效液相色谱领域中研究比较活跃的方向之一。目前，用于该方法中的衍生试剂种类较多，用途较广，而在实际应用中却存在一定的缺点，因此，开发可以满足实际需要的高灵敏荧光衍生试剂以及相关的分析方法意义重大。本论文重点研究了新型荧光衍生试剂的设计合成和表征,从新型衍生试剂的制备、衍生反应条件的优化、色谱分离条件的研究、实际样品测定等方面展开研究工作。具体研究内容如下：第一章：简述了高效液相色谱与高效液相色谱-质谱联用的基本内容和应用；综述了化学衍生化技术的进展；概述了选题意义和主要研究内容。第二章：苯并吖啶酮-5-乙酰琥珀酰亚胺酯（BAAHS）的设计合成及结构表征。第三章：利用苯并吖啶酮-5-乙酰琥珀酰亚胺酯（BAAHS）作为荧光衍生试剂，对12种脂肪胺进行高效液相色谱荧光检测，通过优化衍生化反应条件和色谱分离条件，建立了12种脂肪胺化合物柱前衍生化的高效液相色谱荧光检测方法，并将该方法应用于相关实际样品中脂肪胺的测定，结果表明所建立的方法具有良好的可行性。第四章：利用苯并吖啶酮-5-乙酰肼（BAAH）作为荧光衍生试剂，用于丙酮酸的高效液相色谱荧光检测，通过优化衍生化反应条件和色谱分离条件，建立了丙酮酸的柱前衍生高效液相色谱荧光检测方法，并将该方法应用于大鼠血浆中丙酮酸的测定，实现了大鼠血浆中丙酮酸的高灵敏度检测。第五章：利用2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基氯甲酸酯（DBCEC-Cl）作为荧光衍生试剂，用于内分泌干扰物双酚A（BPA）、辛基酚（OP）、壬基酚（NP）和对特辛基酚（POP）的高效液相色谱荧光检测。通过优化衍生化反应条件和色谱分离条件，建立了BPA、OP、NP和POP的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法，并将该方法应用于环境水样的测定，结果表明所建立的方法具有良好的检测灵敏度。第六章：利用2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基氯甲酸酯（DBCEC-Cl）作为荧光衍生试剂，用于单胺类神经递质多巴胺（DA）、肾上腺素（EP）、去甲肾上腺素（NE）和5-羟色胺（5-HT）的高效液相色谱荧光检测。通过优化衍生化反应条件和色谱分离条件，建立了DA、NE、EP和5-HT的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法，并将该方法应用于大鼠微透析液的分析测定，结果表明所建立的方法具有良好的可行性。