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自19世纪70年代拟除虫菊酯类农药开始使用以来,其在世界农药销售范围内所占比例逐步扩大。在我国广泛应用于农业和室内虫害防治,逐步取代高毒类刹虫剂。菊酯类农药长期、大量不科学使用造成的生态环境、健康等问题已不容忽视。生物修复作为一种安全、经济的环境修复手段,引起人们广泛关注,已起到重要作用。本文对拟除虫菊酯类农药降解菌株的分离鉴定、降解特性等方面作了研究,以期为今后环境修复提供可靠全面的理论基础。同时,由于本试验中使用甲醇作菊酯农药助溶剂,分离条件也适合甲基营养型细菌富集生长,最终从同一菊酯农药降解菌富集液中还分离到一株兼性甲基营养型细菌,并对其分类学地位进行了研究。对农药厂活性污泥中进行富集培养获得菊酯降解富集液,自其中分离得到一株氯氰菊酯类杀虫剂高效降解菌JZL-3,4 d氯氰菊酯降解率达90%,经形态、生理生化及16SrRNA基因序列系统发育分析,鉴定其属于节杆菌属(Arthrobacter sp.)。菌株JZL-3最适生长温度范围在20℃-35℃,40℃下基本不生长最适生长pH在7-8;菌株JZL-3具有耐盐特性,从低盐浓度至高盐浓度下(0.5%-10%)均能生长,在低盐浓度下生长速度明显快于高盐条件。菌株JZL-3对氯氰菊酯的最适降解温度30℃;最适pH为7.0;初始接种量在一定范围内(1%-5%)与降解率呈正相关,当接种量高于7%时,接种量的增加对降解率影响较小;当氯氰菊酯初始浓度为20-50mg/L时,JZL-3的降解效率高;当初始浓度高100mg/L时,降解效率明显降低;菌株JZL-3可以降解主要的七种菊酯且降解速率有所差异,由高到低顺序依次为:氯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、联苯菊酯、功夫菊酯、溴氰菊酯;同时发现Arthrobacter sp.JZL-3对氯菊酯和氯氰菊酯顺反异构体的降解也没有显著的差异;菌体内未检测到质粒DNA,说明JZL-3降解菊酯类农药的功能基因位于染色体DNA上。实验室模拟条件下,对菌株JZL-3修复氯氰菊酯污染土壤的能力及相关影响因素进行了研究。结果表明,JZL-3菌剂在灭菌土壤中的降解效果略好于未灭菌土壤;经过12 d处理,菌株JZL-3对低浓度(<100mg/kg)的氯氰菊酯降解率高于对高浓度(200mg/kg)菊酯农药降解率;考虑到成本、时效的因素,在受污土壤中接入106CFU/g JZL-3降解菌是相对较合适的接种量。由于菊酯类农药以甲醇作为助溶剂,自氯氰菊酯降解富集液中还分离得到一株兼性甲基营养型菌株,命名为JZL-4。16S rRNA基因序列的聚类分析显示,其与菌株Methylopila capsulataIM1T (97.2%), Albibacter methylovorans DM10T (94.9%)和Methylopila helvetica DM9T (94.1%)聚为一支。JZL-4具有明显区别于Albibacter属属菌株Albibacter methylovorans DM10T的一些关键特性,同时与Methylopila属两模式种具备很多相同特性,而又与IM1T和DM9T有所区别。菌株严格好氧为革兰氏阴性、短杆状(0.8-1.2×1.6-2.0gm)、不产芽孢、裂殖、侧生两鞭毛可运动;菌体内积累PHB;最适生长温度30℃,在10--37℃范围内菌株JZL-4均可生长;菌株可在pH 5.0-10(最适6.5-7.5)范围内生长;可耐受盐浓度0-2.5%。菌株JZL-4中的主要细胞脂肪酸是C18:1ω7c和C18:0;主要极性脂包括:乙醇酸磷酯、磷脂酰甘油、磷酸卵磷酯、磷脂酰乙醇胺;主要泛醌为Q-10;GC含量为70.4%;代谢C1化合物是通过异柠檬酸裂解酶缺失的丝氨酸途径。经鉴定,JZL-4T(=ACCC 05406T=DSM 22718T=VKM B-25551)属于Methylopila属的一个新种,并将该新种命名为Methylopila jiangsuensis sp.nov.。