论文部分内容阅读
目的:探讨海马NLRP3在慢性社会隔离所致小鼠认知障碍中的作用。方法:4周龄C57/BL6小鼠随机分为正常群居组(group housed,GH)、慢性社会隔离应激组(social isolation,SI)、小胶质细胞抑制剂米诺环素干预组(social isolation+minocycline treatment,SI+Mino)、NLRP3抑制剂MCC950干预组(social isolation+MCC950,SI+MCC950)。其中GH组(6只/笼)和SI组(1只/笼)在第七周给予生理盐水腹腔注射(每天一次,连续14天);而SI+Mino组(1只/笼)和SI+MCC950组(1只/笼)在第七周腹腔注射相应的药物(每天一次,连续14天)。第八周,采用新旧事物识别实验、新旧位置识别实验、社会认知实验及Y迷宫实验检测各组小鼠认知功能;采用ELISA法检测小鼠血清皮质酮,IL-1β和IL-6的表达;采用RT-PCR法检测小鼠海马GluR1,GluR2,PSD-95和SYP mRNA的表达;采用免疫组织化学法检测小鼠海马小胶质细胞标记物Iba-1和星形细胞标记物GFAP的表达;采用Western blot法检测小鼠海马P2RX7,ITGAM,CD68,NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β,IL-18,GluR1,GluR2,PSD-95和SYP的表达。结果:1.与GH组相比,SI组小鼠在新旧事物识别实验,新旧位置识别实验,社会认知实验中识别指数均显著减少(P<0.05),在Y迷宫实验(P<0.05)中的自发性交替率明显减少;与GH组相比,SI组小鼠海马Iba-1阳性细胞数和活化小胶质细胞百分比明显增加(P<0.05),而GFAP阳性细胞数没有改变;与GH组相比,SI组小鼠海马P2RX7,ITGAM,CD68,NLRP3,Caspase-1,IL-1β和IL-18的蛋白表达水平明显增加(P<0.05);与GH组相比,SI组小鼠血清皮质酮,IL-1β和IL-6的表达没有明显改变;与GH组相比,SI组小鼠海马GluR-1和PSD-95的mRNA水平没有明显改变(P>0.05),但是,SI组小鼠海马GluR-1,GluR-2和PSD-95的蛋白水平显著减少(P<0.05)。2.与SI组相比,SI+Mino组小鼠在新旧事物识别实验,新旧位置识别实验,社会认知实验中识别指数均显著增加(P<0.05),且在Y迷宫实验中的自发性交替率明显增加(P<0.05);与SI组相比,SI+Mino组小鼠海马CD68,NLRP3,Caspase-1,IL-1β和IL-18的蛋白表达水平明显减少(P<0.05)。3.与SI组相比,SI+MCC950组小鼠在新旧事物识别实验、新旧位置识别实验、社会认知实验中识别指数均显著增加(P<0.05),且在Y迷宫实验中的自发性交替率明显增加(P<0.05)。与SI组相比,SI+MCC950组小鼠海马NLRP3,Caspase-1,IL-1β和IL-18的蛋白表达水平明显减少(P<0.05);与SI组相比,SI+MCC950组小鼠海马GluR-1,GluR-2和PSD-95的蛋白水平均显著增加(P>0.05)。结论:慢性社会隔离可能是通过激活海马小胶质细胞NLRP3炎性小体,促进炎症因子释放,抑制突触可塑性从而造成小鼠出现认知障碍。