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目的:结合邻位诱导杂交技术,DNA纳米结构和局域空间内DNA级联反应,发展一个操作简单、快速,灵敏度高,特异性好且能够在复杂样品中使用的通用型蛋白质检测方法,为生物分子检测提供新的思路。方法:通过酶连接反应合成环形DNA模板,利用滚环扩增反应制备得到长链结构的DNA纳米支架。将一对发夹结构的DNA链(H1和H2)与纳米支架通过自组装,合成可响应的DNA纳米灯,将其作为信号探针。以两个核酸适配体作为邻位杂交探针,当有目标蛋白质存在时,一对邻位探针同时识别目标分子,使探针两端连接的DNA链相互邻近并杂交,形成单链DNA。该DNA单链可以通过指点取代反应将发夹H1打开,诱导H1和H2之间发生级联杂交反应,产生荧光信号。通过血清稳定性实验,验证了DNA纳米灯的稳定性;通过动力学实验,与均相DNA级联反应的反应速度和效率进行了比较;通过检测产生的荧光信号,实现对目标蛋白质的定量。利用三种非目标蛋白质作为模型,验证了该分析方法的特异性;通过对血液样品的检测,验证了该分析方法的准确性。结果:研究结果表明,与发夹探针相比,信号探针DNA纳米灯有更好血清稳定性。利用凝血酶作为目标蛋白质模型,本论文发展的检测方法,能够在温育30 min后实现对目标物的检测。与均相DNA级联反应相比,邻位诱导局域空间内DNA级联反应效率更高、速度更快,且有很好的灵敏度,线性范围为0.1 nM-20 nM,检测限为0.091 nM。同时,添加回收率范围是97.1%-103.0%,RSD范围是2.28%-6.78%。说明该方法能够有很好的重复性和选择性。实际血清样品检测相对偏差小于6.5%。说明该分析方法有很好的实用性和准确性。结论:本文发展了一个选择性好,灵敏度高的蛋白质检测方法,该方法操作简单,无需分离,可以在溶液中一步完成,并能够用于复杂生物样品检测。通过改变邻位探针上的识别分子,该方法可以用于其它目标蛋白质检测,有很好的通用性,在生物分析和临床检测中有良好的应用前景。