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大肠杆菌O157：H7(Escherichia coli O157:H7, E. coli O157:H7)是肠出血性大肠杆菌的一个主要菌型,曾在世界范围内多次暴发,严重威胁着人们的健康并造成巨大经济损失。本文建立了两种生物功能化纳米颗粒对大肠杆菌0157：H7进行检测的方法,并用于对人工污染牛奶样品的检测,主要研究方面如下：生物功能化纳米颗粒的制备。利用柠檬酸钠还原法制备粒径为13 nm的金纳米颗粒(Au-NPs),用大肠杆菌O157：H7多克隆抗体、巯基化捕获DNA链、条形码DNA链、探针DNA链等制备生物功能化Au-NPs,利用UV-vis、TEM等对制备和修饰过程进行表征。通过共沉淀法制备粒径为27±4 nm的磁性纳米颗粒(MNPs),采用3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰和戊二醛交联制备得到大肠杆菌0157：H7单克隆抗体功能化的MNPs。生物功能化纳米颗粒检测大肠杆菌0157：H7方法研究。利用生物功能化的MNPs和Au-NPs与目标物大肠杆菌0157：H7进行免疫反应,形成MNPs/目标物/Au-NPs "三明治”式复合体,磁场分离后去杂交将Au-NPs上标记的条形码DNA释放出,通过PCR扩增和电泳对大肠杆菌0157：H7进行定量分析,建立了基于生物条形码的常规PCR的检测方法。该方法对标准样品的最低检测限为10CFU/mL,检测范围为10-106CFU/mL;与大肠杆菌其他血清型和常见食源性病原菌如大肠杆菌086：H2、大肠杆菌0111：K58,大肠杆菌K12,沙门氏菌均不发生交叉反应,特异性好；方法的重复性较好,批内重复性平均变异系数为(6.6±3.3)%,批间重复性平均变异系数为(7.3±3.6)%。在前一种方法的基础上,将Au-NPs上标记的条形码DNA释放出,利用DNA探针杂交条形码DNA引起Au-NPs颜色变化建立基于生物条形码探针和Au-NPs的检测方法,结果表明,对标准样品最低检测限可达到102CFU/mL,该方法具有良好的特异性；而在重复性实验中,批内及批间重复性平均变异系数分别为(2.9±1.3)%和(3.2±1.5)%。大肠杆菌O157：H7人工污染牛奶样品检测研究。应用基于生物条形码的常规PCR对人工污染大肠杆菌O157：H7牛奶样品检测的最低检测限为10CFU/mL;基于生物条形码探针和Au-NPs的检测方法对样品实测的最低检测限为102CFU/mL,并比较了两种检测方法。