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目的： 观察葛根素代谢产物 M2的抗氧化效应；用葛根素代谢产物 M2干预AngII(AngiotensinⅡ)刺激的心肌细胞，观察其对AngII诱导肥大的影响以及心肌细胞内氧化应激指标的变化情况，探讨氧化应激与心肌细胞肥大之间可能的机制，为心肌肥大的发病机制及临床药物防治提供依据。 方法： 采用分步消化、差速贴壁、化学抑制法分离纯化新生 SD大鼠心肌细胞，作原代培养。采用倒置显微镜、透射电镜进行细胞鉴定。用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶作用于心肌细胞，建立心肌细胞氧化应激模型，DHE标记细胞检测细胞内超氧阴离子水平。葛根素及其代谢产物M2、血管紧张素II干预心肌细胞后，DHE标记细胞检测细胞内超氧阴离子水平，FRAP法检测细胞内总抗氧化能力、WST法检测细胞内总SOD活性，鬼笔环肽标记心肌细胞，荧光显微镜拍摄图片，计算细胞表面积大小。荧光定量PCR检测肥大基因和NADPH氧化酶基因的表达。 结果： 1.葛根素及其代谢产物M2对氧化应激的影响； 1.1、氧化应激模型的建立 黄嘌呤（500μmol/l）/黄嘌呤氧化酶（2U/L）作用心肌细胞24-36小时后，心肌细胞内超氧阴离子水平明显升高(P＜0.05)，细胞内总抗氧化能力和总SOD活性无明显变化(P﹥0.05)。 1.2、心肌细胞内超氧阴离子测定； M2（10-7mol/l）分别干预24-36h后，DHE标记心肌细胞，荧光显微镜观察细胞内荧光强度变化，拍摄的图片用IPP6.0进行荧光强度分析，与阳性对照组（黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶组）相比较，平均光密度明显降低(P＜0.05)；用荧光扫描仪进行荧光强度的检测，M2干预组所测得的荧光 ID值明显低于阳性对照组(P＜0.05)。 1.3、细胞内总抗氧化能力测定； M2（10-7mol/l）干预24-36h后，用FRAP法测定细胞内总抗氧化能力，测得 M2干预组细胞内的总抗氧化能力明显高于空白对照组和黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶组(P＜0.05)。 1.4、总SOD活性测定； M2（10-7mol/l）干预24-36h后，用WST法测定心肌细胞内的总SOD活性，测得M2干预组细胞内的总SOD活性明显高于空白对照组和黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶组(P＜0.05)。 2.葛根素代谢产物M2对抗AngII诱导心肌细胞肥大相关机制的探讨 1、AngII对心肌细胞肥大的影响 1.1、心肌细胞内肥大基因ANF、β-MHCmRNA的表达 AngII（10-6mol/l）刺激心肌细胞36小时，荧光定量PCR检测心肌细胞内肥大基因ANF、β-MHCmRNA的表达，相比空白对照组，两种均明显升高(P＜0.05)。 1.2、心肌细胞表面积测定 AngII（10-6mol/l）刺激心肌细胞36小时，用鬼笔环肽标记心肌细胞，荧光显微镜拍照，用软件测量心肌细胞表面积的大小，细胞表面积较空白对照组明显增大(P＜0.05)。 2、AngII对心肌细胞内氧化应激的影响 2.1、心肌细胞内超氧阴离子水平的变化； AngII（10-6mol/l）刺激心肌细胞36小时，DHE标记心肌细胞，荧光显微镜观察细胞内荧光强度变化，拍摄的图片用IPP6.0进行荧光强度分析，对空白对照组相比，平均光密度明显升高(P＜0.05)；用荧光扫描仪进行荧光强度的检测，AngII干预组所测得的荧光 ID值明显低于阳性对照组(P＜0.05)。 2.2、心肌细胞内NADPH氧化酶P47phox的表达； AngII（10-6mol/l）刺激心肌细胞36小时，荧光定量PCR检测细胞内NADPH氧化酶P47phox mRNA的表达，比较空白对照组，P47phox mRNA表达明显升高(P＜0.05)。 2.3、心肌细胞内总抗氧化能力和总SOD活性的检测； AngII（10-6mol/l）刺激心肌细胞36小时，分别用FRAP法和WST法检测细胞内的总抗氧化能力和总SOD活性，与空白对照组相比，稍有升高，但无显著性差异(P﹥0.05)。 3、M2对AngII诱导心肌细胞肥大的影响 3.1、M2干预后心肌细胞肥大基因ANF、β-MHCmRNA的表达 M2与AngII共同作用36h后，检测细胞内肥大基因ANF、β-MHCmRNA的表达，M2+AngII组相比AngII组，ANF、β-MHCmRNA的表达明显降低(P＜0.05)。 3.2、M2干预后心肌细胞面积大小变化 M2与AngII一起作用36h后，测定细胞面积大小，M2+AngII组相比AngII组，心肌细胞面积明显减小(P＜0.05)。 4、M2对AngII诱导心肌细胞肥大时氧化应激的影响 4.1、心肌细胞内超氧阴离子水平的变化； M2与AngII一起作用36h后，DHE标记心肌细胞，荧光显微镜观察细胞内荧光强度变化，拍摄的图片用IPP6.0进行荧光强度分析，与 AngII组相比，平均光密度明显降低(P＜0.05)；用荧光扫描仪进行荧光强度的检测，M2干预组所测得的荧光ID值明显高于AngII组(P＜0.05)。 4.2、心肌细胞内NADPH氧化酶P47phox的表达； M2与AngII一起作用36h后，荧光定量PCR检测细胞内NADPH氧化酶P47phox mRNA的表达，比较AngII组，P47phox mRNA表达明显升高(P＜0.05)。 4.3、心肌细胞内总抗氧化能力和总SOD活性的检测 M2与AngII一起作用36h后，分别用FRAP法和WST法检测细胞内的总抗氧化能力和总SOD活性，与AngII组相比均明显升高(P＜0.05)。 结论： 1.葛根素代谢产物M2具有与葛根素相同的抗氧化效应； 2.氧化应激参与了AngII刺激心肌细胞肥大的作用 3. M2通过抗氧化机制干预AngII诱导的心肌肥大效应。