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目的胶质母细胞瘤(GBM)是最致命性的肿瘤之一,若未及时治疗,其中位生存时间仅有3个月左右。目前,GBM的标准化治疗为最大化的手术切除肿瘤,术后辅助放疗,并联合替莫唑胺化疗,以及免疫治疗的综合性治疗。然而,其中位生存期也仅有14.6个月。而导致其复发和难治的主要因素就在于胶质瘤母细胞瘤干细胞(GSCs)。在前列腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌以及黑色素瘤等多数恶性肿瘤中,内皮素及其受体的浓度远高于正常组织,提示内皮素系统是潜在的抗肿瘤靶点之一。目前,有研究表明:内皮素受体拮抗剂(BQ788)能够抑制GSCs的迁移,并诱导GSCs的凋亡。而研究BQ788对GSCs诱导分化,以及对放疗抵抗GSCs的研究尚未见报道。本文主要探究BQ788对GSCs的诱导分化作用,并与放疗相结合探讨BQ788对放疗的增敏作用,进而评价BQ788治疗恶性胶质瘤的可行性。方法(1)应用不同浓度的BQ788处理人胶质瘤瘤干细胞系NCH-421k以及NCH-644两组细胞,48小时后应用CCK-8检测其生长状态。(2)将人胶质母细胞瘤干细胞系NCH-421k以及NCH-644两组细胞分别用75umol/L的BQ788培养基培养1周,诱导其分化为NCH-421k-dif及NCH-644-dif。(3)用流式细胞术以及免疫荧光染色的方法鉴定干细胞和分化细胞特征性分子标记物的表达。(4)对普通胶质瘤干细胞系(NCH-421k)及其放疗抵抗胶质瘤干细胞系(NCH-421k-IR)分别进行单纯应用BQ788处理、单纯应用放疗处理,应用BQ788及放疗联合处理,检测他们在放疗(放疗剂量为2Gy)后的凋亡率和细胞周期的变化情况。并用western blot检测BQ788药物处理组、放疗处理组以及BQ788联合放疗处理组的细胞凋亡指标pro-casp3。采用统计学软件SPSS 19.0进行数据统计学分析。结果(1)BQ788药物对胶质瘤干细胞的作用表现出剂量依赖性,当BQ788浓度<50umol/L时,则无抑制GSCs的生长作用;而当BQ788浓度>50umol/L,即75umol/L、100umol/L时则表现为抑制GSCs生长的作用。(2)NCH-421k和NCH-644分别应用含有75umol/L的BQ788培养基培养一周后,部分细胞的细胞形态由细胞球逐渐变为梭形,出现贴壁生长。(3)用流式细胞术和免疫荧光检测胶质瘤干细胞系NCH-421k及其分化细胞NCH-421k-dif的干细胞标记物CD133及Nestin均降低,而分化标记物GFAP明显升高。(4)单纯应用BQ788药物处理、单纯应用放疗处理、BQ788联合放疗分别处理NCH-421k及NCH-421k-IR两组细胞后,与对照组对比,凋亡率均明显增高,而BQ788联合放疗组凋亡率最高,BQ788药物处理组次之,单纯放疗组相对较低。(5)比较放疗抵抗细胞NCH-421k-IR与普通胶质瘤细胞NCH-421k两组细胞分别在单纯应用BQ788药物处理、单纯放疗处理以及BQ788联合放疗处理的条件下的凋亡率,前者的凋亡率均低于后者。结论1.内皮素受体拮抗剂(BQ788)能够抑制GSCs的生长。2.BQ788具有诱导GSCs分化的作用,其作用一周后,GSCs的干细胞标志物CD133及Nestin的表达均明显减低,而分化标志物GFAP的表达明显增高。3.较高浓度的BQ788具有诱导GSCs发生细胞凋亡的作用,而对GSCs细胞周期无明显影响。4.BQ788可以提高GSCs放疗敏感性。