【摘 要】
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基因治疗作为治疗疾病的一种手段,尤其是肿瘤治疗,已经越来越多地引起人们的关注。然而缺乏有效安全的基因载体是制约基因治疗实施的一个主要瓶颈。RNA干扰作为一种新的基因
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基因治疗作为治疗疾病的一种手段,尤其是肿瘤治疗,已经越来越多地引起人们的关注。然而缺乏有效安全的基因载体是制约基因治疗实施的一个主要瓶颈。RNA干扰作为一种新的基因治疗技术,能够简单、高效地阻抑特定基因的表达。本文通过对RNA的干扰机制、siRNA载体的运载机制及存在障碍进行讨论,其中靶细胞的摄取和内涵体的逃脱是两个主要的问题。因此,开发具有可控性和较高转染效率的“智能”基因载体成为首要任务。其中pH敏感基因载体的研究受到广泛关注。一种新型的两亲性聚合物—pH敏感基因载体—EHCO,包含多种可以质子化的胺基头部,半胱氨酸片段和两个亲脂性尾部,具有良好的基因转染效率,但具有一定的细胞毒性。论文设计了一种合成EHCO的液相合成方法,并将EHCO的三氟乙酸盐结构改变成盐酸盐结构,且具有产量高和预期毒性小的优点。论文对各个中间体的合成与提出条件进行优化,并获得了各个中间体的核磁共振氢谱与质谱数据。论文对EHCO盐酸盐的溶血性进行实验,发现它在pH7.4和pH6.5时相对溶血效率可忽略不计,而在pH5.4时相对溶血效率高达70%。说明随着pH的变化,EHCO(?)利用其头部带有不同pKa值的胺基基团,改变聚合物的两亲性,选择性地破坏细胞膜,以促进siRNA的内涵体逃脱。
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