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目的:研究白细胞介素22(IL-22)作为一种新型炎症因子对人类胰腺癌细胞增殖、转移和侵袭能力的影响并探索其下游可能机制。探索IL-22对分化程度高低不同的胰腺癌细胞系促癌效果差异。 方法:按分化程度高低选择SW1990和Capan-2两种胰腺导管癌细胞做平行实验。MTT法检测0、50、100、150、200ng/ml浓度的IL-22对两种胰腺癌细胞增殖的影响,并进行两种胰腺癌细胞系之间的平行比较;细胞划痕实验分别观察200ng/ml浓度的IL-22刺激下两种胰腺癌细胞24h和48h后对细胞迁移能力的影响,并进行两种胰腺癌细胞系之间的平行比较;Transwell小室侵袭实验检测200ng/ml浓度的IL-22对细胞刺激后,对侵袭过膜细胞进行结晶紫染色,洗脱后测量其OD值,间接反映过膜细胞多少,进而检测IL-22对细胞侵袭能力的影响,并进行两种胰腺癌细胞系之间的平行比较;RT-PCR检测经200ng/ml浓度的IL-22处理前后,细胞中与肿瘤转移侵袭高度相关的因子VEGF(血管内皮生长因子)、HMGB1(高迁移率族蛋白B1)、MMP-9(基质金属蛋白酶-9)的RNA表达差异,并进行两种胰腺癌细胞系之间的平行比较;Western blot实验检测经200ng/ml浓度的IL-22处理前后,细胞中STAT3、p-STAT3、VEGF、HMGB1、MMP9的蛋白表达差异,并进行两种胰腺癌细胞系之间的平行比较。 结果:MTT实验中,在0、50、100、150、200ng/ml浓度的IL-22作用下,细胞浓度测得的OD值随着浓度增加逐渐增高,对两种细胞系进行线性分析,斜率分别为0.117和0.0558,说明CAPAN-2细胞的增长率大于SW1990细胞的增长率,二者差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示,划痕后24h和48h在200ng/ml浓度的IL-22作用下,划痕相对宽度分别逐渐减小,其中CAPAN-2细胞的24h变化率为13.5%,大于SW1990细胞的24h变化率11.9%,CAPAN-2细胞的48h变化率为30.0%,大于SW1990细胞的48h变化率20.0%,二者差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验结果显示,在200ng/ml浓度的IL-22作用下对侵袭过膜细胞进行结晶紫染色,洗脱后所测量的OD值较空白对照组增加,其中CAPAN-2细胞受IL-22刺激前后增长率54%大于SW1990细胞受IL-22刺激前后增长率33%,说明CAPAN-2细胞受IL-22刺激后侵袭性变化大于SW1990细胞受IL-22刺激后的侵袭性?二者差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,经IL-22刺激后可以明显增强其下游VEGF、HMGB1、MMP-9的mRNA表达水平,其中CAPAN-2细胞三种因子mRNA表达的△△CT值均大于SW1990细胞三种因子RNA表达的△△CT值,提示CAPAN-2细胞受IL-22刺激后三种促癌因子RNA表达增强率大于SW1990,二者差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,经IL-22刺激后可以明显增强STAT3通路磷酸化,STAT3蛋白表达下降,p-STAT3蛋白表达增加,其下游VEGF、HMGB1、MMP-9的蛋白表达水平显著上升,其中CAPAN-2细胞的变化率大于SW1990细胞的变化率,二者差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: IL-22通过磷酸化STAT3通路上调肿瘤增殖转移侵袭相关因子VEGF、HMGB1、MMP-9的mRNA及蛋白表达,从而促进胰腺癌细胞增殖转移和侵袭,并且随着胰腺癌恶性程度的增加,其促增殖转移侵袭效应增强。