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目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)的暴露对青春期雌性大鼠孕酮分泌水平的影响,以及对孕酮合成的限速步骤——类固醇急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)的基因表达的影响。通过对青春期雌性大鼠短期染毒,对参与激素合成有关基因的表达水平进行分析,初步探讨DEHP对雌性生殖毒性的可能机制。预期结果将为DEHP的生殖内分泌干扰研究提供基础资料,为阐明环境内分泌干扰物的生殖内分泌干扰机制及其危害防治研究提供重要的科学依据。方法1、取青春期的雌性SD大鼠32只,随机分到对照组和DEHP(低、中、高)三个实验组中,四个剂量组每组8只。按10mg/kg/d、100mg/kg/d和1000mg/kg/dDEHP分别对各实验组大鼠进行灌胃,并用溶剂(玉米油)作为对照为对照组进行灌胃。2、连续灌胃10天,采集大鼠的血液,分离血清,测定孕酮含量;取大鼠卵巢组织提取总mRNA,逆转录PCR(Reverse Transcription Polymerase ChainReaction,RT-PCR)分析测定StAR和P450scc基因表达水平。3、应用Excel录入数据,统计学分析使用SPSS19.0进行,以α=0.05的检验标准,判断差异是否具有统计学意义。结果1、模型效果邻苯二甲酸单乙基己基酯(Mono-2-ethylhexyl phthalate,MEHP)是DEHP的初级代谢产物,大鼠血清中MEHP含量随着染毒剂量增加呈上升趋势,说明动物染毒成功。2、大鼠体重和卵巢重量变化随着染毒时间延长,各组大鼠体重均增加;随着染毒剂量的增高,体重增加量有减小趋势。随着染毒剂量的增加双侧卵巢重量逐渐减小,高剂量组(1000mg/kg)与其他三组比较,卵巢重量减少有统计学意义(P<0.05)。3、血清中孕酮的检测结果低剂量组(10mg/kg)比对照组(0mg/kg)和中剂量组(100mg/kg)的血清孕酮水平略高,但差异无统计学意义;高剂量组(1000mg/kg)血清孕酮水平明显高于其他三组(P<0.01)。4、各剂量组大鼠StAR mRNA、P450scc mRNA的相对表达量随着染毒剂量的增加,StAR mRNA和P450scc mRNA表达量降低,中剂量组(100mg/kg)和高剂量组(1000mg/kg)与对照组比较,StAR和P450scc的表达量有显著减少(P<0.05)。结论1、DEHP可能影响青春期大鼠卵巢的发育。2、高剂量DEHP暴露可能增加血清孕酮水平。3、DEHP体内暴露可能降低StAR mRNA和P450scc mRNA的转录水平。