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在生产实践中,动物经常受到各种病原体和人工免疫抗原的刺激,这些刺激都会导致免疫应激的发生。免疫应激会造成动物食欲减退、生长缓慢、免疫功能下降等。本试验所用的鼠李糖乳杆菌MLGA分离自健康鸡消化道,本课题组前期研究发现鼠李糖乳杆菌MLGA能够提高肉鸡的生长性能,提高机体的天然免疫力,具有良好的益生作用。本试验以三黄鸡为研究对象,采用脂多糖(LPS)免疫应激模型进行饲养试验,探讨饲粮中添加鼠李糖乳杆菌MLGA对免疫应激条件下肉鸡生长性能、血清相关生化指标、小肠形态结构和免疫相关基因表达的影响及作用机制。选用健康、体重相近的252只1日龄三黄鸡(母),随机分成3个处理组,每个处理6个重复,每个重复14只鸡。3个处理组为对照组、LPS刺激组和鼠李糖乳杆菌+LPS组,LPS组饲喂基础饲粮,于14日龄、16日龄、18日龄、20日龄重复腹腔注射LPS,注射前用生理盐水溶解。注射剂量为:14日龄(300μg/kg体重)、16日龄(400μg/kg体重)、18日龄(500μg/kg体重)、20日龄(600μg/kg体重)。注射量为0.5ml/只,对照组饲喂基础饲粮,相应日龄注射相应体积生理盐水,鼠李糖乳杆菌+LPS组饲喂添加1×10~9cfu/kg鼠李糖乳杆菌MLGA的基础饲粮,免疫应激处理同LPS组。分别在第21和第28日龄每组每个重复随机挑选一只鸡,心脏采血,分离血清,用ELISA法测定血清相关生化指标;采集十二指肠、空肠和回肠中段用于石蜡切片和苏木精-伊红(HE)染色以测定小肠形态结构;采集回肠黏膜以测定紧密连接蛋白表达水平;采集回肠、脾脏和法氏囊组织,测定免疫相关基因的表达量。试验结果如下:1.LPS诱导的免疫应激显著提高肉鸡21-28日龄和21-35日龄料重比(P<0.05)。饲粮中添加鼠李糖乳杆菌MLGA具有提高免疫应激条件下肉鸡21-35日龄平均日增重的趋势(P=0.084)。2.LPS诱导的免疫应激显著提高第21日龄肉鸡血清白介素(IL)-1β、IL-12含量(P<0.01)以及第28日龄皮质酮(CORT)、IL-2和IL-6含量(P<0.05或P<0.01),并显著降低第21日龄IL-8含量(P<0.01)和第28日龄IL-10含量(P<0.05)。饲粮中添加鼠李糖乳杆菌MLGA显著提高免疫应激条件下第21日龄肉鸡血清IL-10含量(P<0.05),并具有降低第28日龄IL-6(P=0.070)和IL-8(P=0.076)含量的趋势。3.LPS诱导的免疫应激显著降低第21日龄肉鸡空肠和回肠绒毛长度、绒毛长度与隐窝深度的比值以及第28日龄十二指肠和空肠绒毛长度与隐窝深度的比值(P<0.05),并显著提高第21日龄回肠隐窝深度及第28日龄十二指肠和空肠隐窝深度(P<0.05)。饲粮中添加鼠李糖乳杆菌MLGA显著降低免疫应激条件下第21日龄肉鸡回肠隐窝深度和第28日龄十二指肠和空肠隐窝深度(P<0.05),并显著提高第21日龄回肠绒毛长度与隐窝深度的比值以及第28日龄十二指肠、空肠绒毛长度与隐窝深度的比值和十二指肠绒毛长度。LPS诱导的免疫应激显著降低第21日龄肉鸡回肠黏膜Claudin-1、Occludin和ZO-1以及第28日龄Occludin mRNA表达(P<0.05)。饲粮中添加鼠李糖乳杆菌MLGA显著提高免疫应激条件下第21日龄肉鸡回肠黏膜ZO-1以及第28日龄回肠黏膜Claudin-1、Occludin和ZO-1mRNA表达(P<0.05)。4.LPS诱导的免疫应激显著提高第21日龄肉鸡回肠TLR2、TNF-α,第28日龄回肠TNF-α,第21日龄脾脏IL-1β,第21日龄法氏囊CATH-3、IL-1β、IL-12,第28日龄法氏囊A20、IL-1β、IL-12、TNF-αmRNA表达(P<0.05),并显著降低第21日龄回肠CATH-3和第21日龄法氏囊A20 mRNA表达(P<0.05)。饲粮中添加鼠李糖乳杆菌MLGA显著降低免疫应激条件下第21日龄肉鸡回肠TLR2、IL-12、TNF-α和脾脏、法氏囊IL-1β以及第28日龄法氏囊A20、IL-1β、IL-10 mRNA表达(P<0.05),并显著提高第28日龄回肠A20、脾脏TLR2 mRNA表达(P<0.05)。综上所述,LPS诱导的免疫应激降低肉鸡生长性能,提高血清中促炎细胞因子的含量,降低血清中抗炎细胞因子的含量,破坏肠道屏障,改变机体免疫相关基因的表达。饲粮中添加1×10~9cfu/kg鼠李糖乳杆菌MLGA能够改善免疫应激条件下肉鸡生长性能,降低血清中促炎细胞因子的含量,提高血清中抗炎细胞因子的含量,修复肠道损伤,通过调节免疫相关基因的表达增强机体对免疫应激的抵抗力,减轻免疫应激对机体造成的损伤。