角毛壳葡聚糖酶基因的克隆和在毕赤酵母中的表达

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:smartq
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
中国是个农业大国,农药的用量巨大,且以化学农药为主。化学农药的长期使用会造成一系列的环境问题和食品安全问题,如易诱发抗药性,易产生剂量依赖,专一性差而破坏生态结构等。随着环保意识的提高,生物农药为此提供了行之有效而且绿色环保的解决方向。毛壳菌(Chaetomium spp)是一类具有生防能力的真菌,可以用来做微生物源生物农药。它可产生降解植物病原真菌的细胞壁的几丁质酶和葡聚糖酶,结合其它一些机制来有效抑制植物病原真菌生长。本研究旨在找到角毛壳菌的葡聚糖酶基因序列并测定其蛋白对植物病原菌的防治能力。从角毛壳菌基因组中克隆到葡聚糖酶基因cgc,全长1709bp,其中83bp-267bp是内含子序列。生物信息学方法分析表明此基因序列共编码541个氨基酸,前19氨基酸是信号肽序列,理论大小为55.6kDa。通过构建重组质粒pPIC9K-cgc,电转化毕赤酵母GS115菌株中,筛选后得到4个Mut+阳性转化子。诱导表达后得到目的蛋白在60kDa与100kDa之间。角毛壳重组葡聚糖酶蛋白最适温度约45℃,最适pH5.0,粗酶液酶活0.1283U,50%浓度下,对尖孢镰刀菌孢子萌发的抑制率为11.8%,在植物病原菌生物防治研究上具有潜在的理论和实践上的意义。
其他文献
会议
正丁醛自缩合合成辛烯醛及辛烯醛加氢是工业生产辛醇的两个重要反应单元,将两个单元进行反应过程集成可以简化工艺流程、降低能耗和减少设备投资。因此,研究正丁醛自缩合反应
会议
开发各种清洁的可再生能源已成为能源发展的紧迫问题,燃料乙醇作为石油的主要替代品,将在今后的能源问题中处于极其重要的战略地位。在燃料乙醇的制备过程中,乙醇的脱水提纯环节
森林生态系统不仅是人类赖以生存的重要自然资源,是应对全球温室效应、生态失衡等环境问题的重要保障,也是生态安全和人类社会可持续发展的重要基础。其功能的发挥有赖于森林
本文分别提取单味药麻黄、羌活、生姜和药对麻黄-羌活、麻黄-生姜中的挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对单味药麻黄、羌活、生姜和药对麻黄-羌活、麻黄-生姜中的挥发油化学成分进行鉴定,进一步通过直观推导式演进特征投影法(HELP)对二维的色谱/质谱数据进行解析,并利用可变移动窗口因子分析(AMWFA)法分析不同体系中的共有组分。麻黄共鉴定出60个组分,占挥发油总量的63.43%,主要成分
会议
目的:探讨口服人参皂甙(ginsenoside,GS)对急性肾衰(acute renal failure,ARF)大鼠的肾保护作用过程中肾和下丘脑缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达变化
会议
会议