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第一部分:人脐静脉内皮细胞株(Eahy926)氯化钴诱导缺氧模型的建立及不同浓度川芎嗪对缺氧后人脐静脉内皮细胞的保护作用目的:建立氯化钴诱导Eahy926细胞缺氧模型,并初步探讨不同浓度川芎嗪对缺氧后人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法采用不同浓度氯化钴诱导Eahy926细胞株,建立氯化钴1.6mmol/L诱导缺氧模型;将细胞分为正常对照组、氯化钴1.6mmol/L组,氯化钴1.6mmol/L+川芎嗪0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.32mg/ml,Hoechst法、CCK-8法测定各组Ehy926细胞活力。结果与正常对照组相比,氯化钴组细胞活力明显下降(P<0.05);与氯化钴组相比,除川芎嗪0.32mg/ml组外,川芎嗪各浓度组Eahy926细胞活力上升(均P<0.05)。结论川芎嗪能够有效地升高氯化钴诱导Eahy926细胞缺氧模型的细胞活力,其中川芎嗪0.08mg/ml和0.16mg/ml组对细胞活力影响显著。第二部分:川芎嗪对人脐静脉内皮细胞株(Eahy926)氯化钴诱导缺氧后纤溶功能影响研究目的:建立氯化钴诱导Eahy926细胞缺氧模型,探讨川芎嗪在缺氧条件下对血管内皮细胞纤溶功能的影响。方法:细胞分为对照组、氯化钴干预组和川芎嗪低、高浓度组,利用氯化钴(1.6mmol/L)模拟Eahy926细胞缺氧环境,建立缺氧模型,TMP干预组分别用0.08和0.16mg/ml的TMP干预。Hoechst法、CCK-8法检测各组细胞活力,RT-PCR观察各组细胞组织型纤溶酶原激活物(tissue-typeplasminogen activator, t-PA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator, u-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitortype-1, PAI-1 )mRNA表达,双抗体夹心ELISA法检测各组细胞培养上清液中t-PA、u-PA、PAI-1含量。结果:与对照组相比,缺氧组及TMP干预组均出现细胞活力下降(P<0.01),但与缺氧组相比,TMP干预组细胞活力上升(P<0.01),且高浓度组较低浓度组上升明显(P<0.01);RT-PCR结果显示:与对照组相比,缺氧组t-PA mRNA表达量降低(P<0.01),细胞培养上清液t-PA含量减少(P<0.01);与缺氧组比,高低浓度TMP处理组t-PA mRNA表达量及细胞培养上清液t-PA含量均增高,具有统计学差异(P<0.01);而高浓度较低浓度TMP干预组,t-PA mRNA表达量升高(P<0.05),细胞培养上清液t-PA含量增加(P<0.01)。结论:川芎嗪能够浓度依赖性减轻Eahy926细胞的缺氧损伤,并通过调节其t-PA mRNA表达及上清液t-PA的分泌,影响内皮细胞的纤溶功能。