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[目的]： 本研究通过利用miR-375过表达（miRNA mimics）和特异性抑制载体(miRNA inhibitor)转染到选取的胰岛β细胞MIN6细胞系，观察miR-375表达变化引发的生物学效应和下游靶基因的表达改变，探讨miR-375对其下游靶基因的影响，为2型糖尿病的发病机制提供线索，并为其早期干预提供理论依据。 [方法]： 1.结合数据库和大量文献分析miR-375的基本信息、生物学功能及其在T2DM中的表达情况，并筛选出其调控的参与T2DM的发生发展的靶基因。 2.选取胰岛β细胞MIN6细胞系，分别用含11.1 mmol/L(正常组)、25mmol/L（高糖组）葡萄糖浓度的培养基(DMEM)进行MIN6细胞培养，培养48h后用光学显微镜观察胰岛MIN6细胞的形态。构建miR-375基因的过表达载体（miRNA mimics）和特异性抑制载体(miRNA inhibitor)，使用lipo3000按以下分组:空白对照、阴性对照、Mimics-Negative Control、miR-375 mimics、Inhibitor-Negative Control和miR-375 inhibitor转染到不同糖浓度培养后的MIN6细胞中。 3.结合文献报导的miR-375在2型糖尿病中的表达和本实验室的细胞系样品验证，分析miR-375在细胞中的表达情况。脂质体转染改变MIN6细胞系中miR-375的表达，通过Real-time PCR测定经过不同方式处理的细胞中的miR-375和各基因的表达水平，验证miR-375在2型糖尿病中调控的靶基因，证实相关靶基因参与2型糖尿病的发生发展。 [结果]： 1.通过生物学靶基因预测网站进行预测，初步推测Pdk1、Traf6、Vegfb、Prkaa1、Adipor2、Acsl3、Insr、Jak2、Slc2a4、NFKB2及Pik3ca,11个与T2DM发生发展相关的靶基因可能受到miR-375的下游调控。 2.使用特异性miR-375过表达和抑制物载体转染到不同葡萄糖浓度组的胰岛β细胞系MIN6细胞中，qRT-PCR检测结果显示，miR-375在正常糖浓度过表达组、高糖过表达组中表达量均升高（P＜0.05），并且正常糖浓度过表达组miR-375的表达高于高糖过表达组(P＜0.05);在正常糖浓度抑制组、高糖抑制组中miR-375的表达无明显差别。这些结果显示本课题研究中过表达载体转染成功。 3.qRT-PCR检测结果显示，挑选出的11个基因中，11个基因均有表达。其中与正常糖浓度阴性对照组相比，正常糖浓度过表达组中Pdk1、Slc2a4、Traf6、Vegfb、Prkaa1、Adipor2、Acsl3、Insr、Jak2、NFKB2、和Pik3ca的表达量降低(P＜0.05);高糖过表达组中Pdk1、Prkaa1、Adipor2、Insr、Jak2、Nfkb2、和Pik3ca的表达量也降低(P＜0.05);并且正常糖浓度过表达组中的Pdk1、Prkaa1、Adipor2、Insr、Jak2、Nfkb2、和Pik3ca的表达水平低于高糖过表达组（P＜0.05）。 [结论]： 1.miR-375在高糖过表达组、正常糖浓度过表达组MIN6细胞系中的表达均有差异，且差异均有统计学意义，表明不同糖浓度的miR-375过表达体的MIN6细胞模型构建成功，为后续实验提供稳定的细胞模型。 2.miR-375在高糖胰岛β细胞MIN6细胞株中表达下调。其可能通过参与多种与T2DM发生发展相关的通路，抑制相关基因 Pdk1、Prkaa1、Adipor2、Insr、Jak2、Nfkb2、Pik3ca的表达，参与胰岛素抵抗，影响2型糖尿病的发病。