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由尖孢镰刀菌古巴专化型引起的香蕉枯萎病是一种具有毁灭性的土传维管束病害,目前还没有一种防治效果理想的化学药剂,且化学防治存在田间药剂流失严重、危害环境和人类的健康等问题。因此,培育抗病品种成为十分迫切的替代策略。探讨尖孢镰刀菌的致病相关基因的功能,可以深入了解尖孢镰刀菌的致病机理,有利于抗病育种研究。前期蛋白质组学研究发现尖孢镰刀菌古巴专化型4号小种(Foc4)中的过氧化氢酶1 (cat1)基因和细胞色素c过氧化物酶(CcP)基因受到巴西蕉诱导上调表达,为研究cat1和CcP基因在Foc4侵染香蕉过程中的作用,利用同源重组方法分别敲除Foc4的cat1和CcP基因,并对敲除子进行了回复,而后对敲除子/回复子进行了表型分析和致病性测定。结果如下:1.成功扩增Foc4的cat1基因和CcP基因左右侧同源臂,并构建了带GFP (绿色荧光蛋白)标记的敲除载体。2.利用PEG介导的原生质体转化法,对Foc4菌株进行了基因敲除,获得带有绿色荧光蛋白和潮霉素B双标记的cat1基因缺失突变体和CcP基因缺失突变体。通过融合PCR方法构建对应的转化片段,转化敲除子,得到带有G418抗性的cat1基因回复突变体和CcP基因回复突变体,且回复菌株的表型和致病力均和野生型一致。3.相对于野生型菌株,cat1基因缺失突变体的菌丝和孢子形态、菌落生长、抗渗透压胁迫和细胞壁选择性压力等方面均和野生型菌株无异;但在抵抗外源氧胁迫、细胞壁穿透和对巴西蕉致病性这些方面的能力均有所减弱,推测cat1基因在Foc4入侵时抵抗寄主香蕉分泌的活性氧过程中起作用,从而参与到Foc4对香蕉的致病过程中。4.相对于野生型菌株,CcP基因缺失突变体虽在抵抗外源氧胁迫方面能力有所下降,但在菌丝和孢子形态、菌落生长、细胞壁穿透、抗渗透压胁迫、细胞壁选择性压力、离体叶片定殖能力和对巴西蕉致病性等方面均和野生型菌株无异。5.cat1和CeP基因缺失突变体对纤维素的利用能力明显降低,推测cat1和CcP基因在Foc4的纤维素利用调控途径中起作用。