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银杏(Ginkgo biloba L.)是裸子植物中最古老的孑遗植物,银杏叶具有抗氧化作用,同时对促进血液循环、自由基的清除、心血管病等也具有着较为明显的药理作用。萜内酯化合物和黄酮类化合物是银杏叶中主要的活性成分,其中萜内酯类化合物主要包括银杏内酯A、B、C、J和M。由于银杏内酯中各个单体分子结构十分相近而分离较为困难。目前常见分离方法包括高效液相色谱、高速逆流色谱和柱层析,这些方法复杂且大多成本较高、操作周期长。为寻找更为简便高效的分离方法,我们对银杏叶有效成分的分离进行了探索,结果发现,通过筛选和优化合适的分配体系,可以选择性萃取得到富含银杏内酯A的部位,此外,我们还对银杏内酯A的稳定性进行了研究。1.银杏叶用95%乙醇超声提取得到浸膏,浸膏预处理工艺条件为:用50%乙醇溶液溶解浸膏,石油醚脱酯3次后,水相溶液用乙酸乙酯-石油醚混合溶剂(40:60,v/v)萃取2次,萃取所得有机相经0.1%NaOH溶液洗涤2次,减压蒸馏得银杏内酯提取物,最终所得产物中银杏内酯A的含量由1%左右提升至30%左右。2.在聚乙二醇体系下,分别用两种萃取方法来分离银杏内酯A。一是将银杏内酯提取物溶于PEG水溶液-乙醇的混合溶液中,再用有机溶剂萃取,所得产品中银杏内酯A含量为46%左右;二是将银杏内酯提取物溶于有机溶剂中,用PEG水溶液-乙醇的混合溶液进行萃取,分得的下相再用另一有机溶剂萃取。实验结果表明第二种萃取方法效果更好。试验过程中,以银杏内酯A的含量和萃取率为指标,通过正交试验法优化得到最佳反萃取条件:当以乙酸乙酯-石油醚混合溶剂(28:72,v/v)溶解银杏内酯提取物,用分子量为6000的6%(w/w) PEG水溶液-乙醇混合溶液(70:30,v/v)进行萃取分液得到下相,下相再以乙酸乙酯-石油醚混合溶剂(15:85,v/v)进行萃取。最后萃取所得有机相经高效液相色谱检测,银杏内酯A的含量达79%,计算出萃取率为22%。3.将银杏内酯提取物分别置于酸、碱、高温环境来探讨银杏内酯A的稳定性。碱性环境下银杏内酯A的稳定性较差,碱性越强,稳定性越差;酸性增强其稳定性有较小程度下降;温度高于80℃时稳定性变差;碱性和高温条件同时存在下稳定性极差。