前言:矽肺是由二氧化硅（SiO₂）粉尘引起的、以肺纤维化为主的,呈不可逆性进展的组织破坏性疾病。早期病变以肺间质炎症、肺泡巨噬细胞（AM）聚集及肺泡上皮细胞损伤与修复为主要特征。在参与矽肺纤维化发生、发展的多种细胞中,以活化的AM在纤维化起始及进展过程中的作用最为关键。AM是肺内重要的防御细胞,它不仅可以吞噬外来的有害物质,还可以合成和释放大量具有多种生物活性的细胞因子、前炎症介质、趋化因子及蛋白酶类等,这些因子的生物学作用相互交叉与重叠,并相互影响,从而构成复杂的细胞因子网络,在肺炎症/肺纤维化发生发展过程中发挥极其重要的作用。其中转化生长因子（TGF）-β1和肿瘤坏死因子（TNF）-α是研究最深入、最关键的细胞因子,前者对成纤维细胞有趋化作用和致有丝分裂活性,可刺激细胞外基质和平滑肌肌动蛋白α基因表达,改变成纤维细胞收缩表型、调控肺泡Ⅱ型细胞增生。后者的作用之一是能诱导AM产生TGF-β1,我们前期的实验已经证实SiO₂能诱导二者在RAW264.7细胞中表达明显增高。MAPKs激酶可对多种细胞外刺激起反应而活化,在调节细胞生长、分化和凋亡的信号转导过程中发挥了重要的作用。大部分信号转导通路通过转录因子作用于靶基因。MAPKs家族成员磷酸化常常导致下游核转录因子如NF-KB、AP-1、Erg-1等的活化,从而引起下游因子表达的改变。已有文献报道SiO₂能诱导肺纤维化效应细胞的MAPK和AP-1的活化,因此我们假设MAPKs/AP-1信号通路在SiO₂诱导RAW264.7细胞TNF-α和TGF-β1表达中发挥作用,此研究尚未见文献报道。目的:探讨MAPKs/AP-1信号传导通路在SiO₂诱导RAW264.7细胞TNF-α和TGF-β1表达中的作用。方法:小鼠巨噬细胞（RAW264.7）培养后用100μg/ml的SiO₂刺激至预定的时间。我们利用western blotting检测p-p38激酶,p-Erk,p-JNK以及核蛋白中AP-1（c-jun/c-fos）表达;不同浓度的SB203580和PD98059预处理细胞分别阻断p38激酶和Erk活性,不同浓度的Curcumin（AP-1的阻断剂）预孵育细胞来阻断AP-1活性,C-Jun显性负性突变体（TAM67）被转染进细胞阻断AP-1的活性,AP-1 DNA结合活性用EMSA检测;TNF-α和TGF-β1的mRNA和蛋白表达用RT-PCR和ELISA检测。结果:（1）在RAW264.7细胞中,SiO₂诱导磷酸化的p38激酶和Erk活性增高,均于120min到达高峰,但磷酸化的JNK没有表达。（2）SB203580和PD98059能分别阻断p-p38激酶和p-Erk的活性,并呈剂量依赖性,50μMPD98059能明显抑制SiO₂诱导的TNF-α和TGF-β1的表达,但20μM SB203580没有这个作用。（3）SiO₂刺激3h后AP-1DNA结合活性明显增高,6h恢复到基础水平;PD98059能明显抑制SiO₂诱导的AP-1DNA结合活性,而SB203580没有抑制作用。（4）10μM Curcumin能抑制SiO₂诱导的核蛋白AP-1（c-jun/c-fos）的表达,20μM Curcumin抑制作用最强;20μMCurcumin能明显抑制TNF-α和TGF-β1的表达。（5）TAM67能明显下调SiO₂诱导的AP-1DNA结合活性,并抑制TNF-α和TGF-β1的表达。结论:1.SiO₂可诱导RAW264.7细胞TNF-α和TGF-β1表达。2.SiO₂可活化RAW264.7细胞MAPKs/AP-1信号通路。3.首次发现Erk/AP-1信号通路参与调节了SiO₂诱导RAW264.7细胞产生的TNF-α和TGF-β1表达。4.首次发现Curcumin在SiO₂刺激RAW264.7细胞产生的TNF-α和TGF-β1表达中起抑制作用,为肺纤维化治疗提供了新策略。