【摘 要】
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该试验将克隆于质粒pSPORTI的慈菇蛋白酶抑制剂(arrowhead proteinase inhibitor,API)基因通过花粉管道法、浸种法、子房注射法转移到自交系Mo17、330、340、M67、853、9046
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该试验将克隆于质粒pSPORTI的慈菇蛋白酶抑制剂(arrowhead proteinase inhibitor,API)基因通过花粉管道法、浸种法、子房注射法转移到自交系Mo17、330、340、M67、853、9046中.通过卡那霉素筛选、田间、室内抗虫试验,获得抗虫株系D02、D07、D31、D34、D36、86-1、87-3、88-1.在R<,2>、R<,3>代、通过自然感虫、人工接虫、室内喂虫等方法,以折蓼率、死虫数、百株蛀孔数、百株活虫数、单虫体重均值等为主要鉴定标准,对自交系后代进行抗虫性鉴定.鉴定结果表明:D02、D07、D34、D36、86-1株系具有一定的抗虫性,且D36株系在第三代已经纯合.在第二代,对抗虫性与对照相比差异显著的品系进行过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)同工酶分析,从酶谱上可以明显看出,转基因品系与对照相比有较大差异.将筛选出的抗虫品系,对其进行PCR扩增,得到长度约330bp和640bp的扩增产物.证实了通过花粉管通道法、浸种法可以有效地进行玉米基因的转移,转化后代具有抗螟性,且能够在后代中遗传.
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