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目前认为,左室肥厚是影响高血压病(EH)患者病残率和病死率的一个强烈的独立危险因素。因此,逆转左室肥厚已成为当前治疗EH的重要目标之一。左室肥厚的细胞病理学基础不仅表现在心肌实质细胞的肥大,还有心脏成纤维细胞(CFs)的过度增殖和细胞外基质(ECM)大量沉积,导致心肌纤维化。EH心肌纤维化可引起心室功能不全、冠脉储备下降和严重的室性心律失常,使EH患者发生心力衰竭和猝死的危险显著增加。业已证实,体液因素是诱导心肌纤维化的主要因素。流行病学资料显示,EH左室肥厚患者的病死率与性别显著相关,男性病死率显著高于女性,表明EH左室肥厚患者的预后与雌激素水平有关。临床资料证实,在标准降压治疗基础上给予绝经后EH患者17β—雌二醇(E2)可使左室重量进一步降低,表明E2可能具有逆转左室肥厚的作用。迄今,雌激素在左室肥厚发生中作用的问题尚不十分清楚。文献报道,E2可抑制CFs增殖和胶原合成功能,但是E2是否影响心脏ECM降解,尚无相关文献报道。本课题研究E2对CFs的基质金属蛋白酶(MMPs)与组织金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的作用,探讨雌激素对心脏ECM降解的影响,旨在为EH心肌纤维化提供新的认识,也为EH左室肥厚的防治开辟新的途径和提供理论依据。 本研究以培养的雌性、雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠CFs为实验模型,采用明胶酶谱、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹 $@Y4k#f4t%(6#一 (Western blot)等技术,分别观察:(1)E。对雌性、雄性大鼠 CFs培养上清明胶酶活性的影n阶(2)EZ对雌性、雄性大鼠CFS MMP-l、MMP-2 SRNA水平的影响;(3)E。对雌性、雄性大鼠 CFs TIMP-l、TIMP-2 mRNA水平的影响:(4)EZ对雌性、雄性大鼠 CFS MMPI和 TIMP-l蛋白水平的影响。 研究结果显示:门)雌性大鼠乙醇对照组与空白对照组间CFS明胶酶活性无显著性差异(P>0,仍)*在10“’*、10-*气10-*戈10-*气10“*M&干预组,雌性大鼠CFS明胶酶活性比空白对照组分别增加(4士11)%、(6上13)%、(66114)O、(8311)0和(90I180,与乙醇对照组比较均具有显著性差异(均*<0刀1)。(二)雄性大鼠乙醇对照组与空白对照组间*k 明胶酶活性无显著性差异(P>0刀5)。在 10’*、10-*、10“*、IO’*、10“*M E*于预组,雄性大鼠 CFS明胶酶活性比空白对照组分别增加ps i4)o/3415)o/83I6)O/ 士6)O和( 10士10)%,与乙醇对照组比较均具有显著性差异(均P<0刀1人门)雌性大鼠空白对照组、乙醇对照组和 10“”、10-\ 10”‘、10”乙 10“‘M E。干预组的 CFs MMP-lmRNA水平分别为 0.25士0刀2、0.23士0刀3、0.26士0刀2、0卫7士0.02、0.34士0.03、0。38士0,04和 0.42士0.04,其中空白对照组与乙醇对照组间无显著性差异(P>0.05L 10’‘M E。干预组 CFs MMP4 水平与空白对照组比较差异显著u叩.05人 10‘7、10”6M E。于预组 MMP上<删A水平与空白对照组比较有非常显著性差异(均P<0刀1)。(4)雄性大鼠空白对照组、乙醇对照组和 10“’0门\ 10”\ 10“乙 10’6M E。干预组的 CFS MMPl水平分别为 0.24i0.02、0.23i0.02、0.27士0.03、0.26士0.03、0.32士0.03、0.39上0刀5 和 0.45土0.04,其中空白对照组与乙醇对照组间无显著性差异 (P>0刀5人 10“SM EZ干预组 MMP* 水平与空白对照组比较差异显著 (尸<0刀5L 10”乙 10”‘M EZ干预组MMP二 水平与空白对照组比较有非常显著性差异(均 P<0.01)。(5)10”‘’、10”9、10“‘、10-’、10-‘M E。对大鼠CFs MMPJ 水平的上述影liN均无显著性别差异(均 P<0.05\“)雌性大鼠转录因子激活蛋白一1(Apl)抑制剂姜黄素+10”’M EZ组的 CFSMMPI mRNA水平(0二5土0*3)较 10-’M E。组(0.38士0刀4)显著降低 (尸<0刀1人(7)雄性大鼠姜黄素+10-’M E。组的 CFS MMP八 水平①.24 -4- $Q了6天亏您士6(妨土一士0.02)较10”M比组(0.39士0.05)显著降氏(尸功刀1)。(8)恤大鼠空白对照组、乙醇对照组和 10”10*“9*”8*0”7门0”‘M EZ干预组的 CFS MMPZmRNA水平分别为0.49士0刀l、0.50士0刀2、0.54士0刀2、0.62士0刀2、0.68士0.02、0.67士0.03和 0.70士0.03,其中空白对照组与乙醇对照组间无显著性差异(P>0.05人 10“”M E。干预组 MMP毛 m洲A水平与空臼对照组比较有显著性差异(P<0刀5人10“\10“\10”乙10”‘M氏干预组*M卜2 m RNRNA水平与空白对照组比较有非常显著性差异(均尸<0刀1)。(9)雄性大鼠空白对照组。乙醇对照组和10”’\10“\10“8、10“乙10“‘ME。干预组的CFsMMPZmRNA水平分别为 0.sl士0.02、0.50土001,0.55土0刀1,0石4上0刀2、0.67士0刀2,0石8士0刀2和 0.71士0刀3,其中空?