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目的结肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一。目前，外科切除联合化疗和/或放射治疗仍然是针对结肠癌的主要治疗方法，但是仍有很高的肿瘤复发率。虽然辅助放化疗能够在一定程度上延长患者的生存期，但同时也伴随着严重的副作用，因此急需发展更有效的治疗结肠癌的策略。近年来，临床前数据表明肿瘤干细胞（cancer stem cell，CSC）起始了肿瘤的生长并且是肿瘤自我更新、分化、复发和转移以及放化疗耐受性的关键。根据肿瘤干细胞（CSC）理论，只有靶向清除CSC，才有可能治愈肿瘤。因此，本文以CD44为筛选标志，从小鼠结肠癌细胞系CT-26中分选出CD44+细胞作为小鼠结肠癌干细胞，探讨CD44+CT-26细胞裂解物和总RNA致敏的树突状细胞（dendritic cell，DC）是否能诱导靶向肿瘤干细胞的抗肿瘤免疫应答。方法用免疫磁珠法分离获得CD44+CT-26细胞，用含20ng/ml bFGF、20ng/mlEGF、2%B27的无血清DMEM/F12培养基培养扩增。将CD44+CT-26的细胞裂解物或总RNA分别作为抗原负载小鼠骨髓来源的DC，获得Pro-DC和RNA-DC疫苗，免疫接种有CD44+CT-26细胞的BALB/c小鼠，进行免疫保护实验和免疫治疗实验，每2-3天测量肿瘤大小并观察瘤体生长及小鼠存活情况。取小鼠的脾脏，体外检测T细胞的细胞毒性以及IFN-γ分泌能力。结果（1）免疫保护组：与PBS组和未致敏DC组相比，Pro-DC组和RNA-DC组的成瘤时间延迟且肿瘤生长缓慢，尤其是Pro-DC组在接种后第15天仍未长出肿瘤。Pro-DC组和RNA-DC组的肿瘤重量显著低于对照组和未致敏DC组（P<0.05）；生存周期分析发现，Pro-DC和RNA-DC组小鼠的生存期显著长于PBS组和未致敏DC组（P<0.05），第50天时未致敏DC组和PBS组小鼠已经全部死亡，至第60天实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的生存率分别为60%和50%；Pro-DC和RNA-DC组CTL对CD44+CT-26的杀伤作用及细胞上清液中IFN-γ的分泌量显著高于PBS组和未致敏DC组（P<0.05）；另外，与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫保护作用更加显著（P<0.05）。（2）免疫治疗组：与PBS组和未致敏DC组相比，经Pro-DC和RNA-DC治疗后，肿瘤的生长受到了显著的抑制。实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的肿瘤重量显著低于对照组和未致敏DC组（P<0.05）；Pro-DC和RNA-DC组小鼠的生存期显著长于PBS组和未致敏DC组（P<0.05），第50天时未致敏DC组和PBS组小鼠已经全部死亡，至第60天实验结束时，Pro-DC组和RNA-DC组的生存率分别为60%和10%；Pro-DC或RNA-DC组CTL对CD44+CT-26的杀伤作用以及细胞上清液中IFN-γ的分泌量显著高于PBS组和未致敏DC组（P<0.05）；另外，与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫治疗作用更加显著（P<0.05）。结论（1）免疫保护组：Pro-DC和RNA-DC疫苗的免疫诱导机体产生了有效的免疫保护作用，能够延缓肿瘤出现，抑制肿瘤的生长，并且显著延长荷瘤小鼠的生存时间。另外，Pro-DC和RNA-DC诱导机体产生了特异性CTL，对CT-26肿瘤干细胞有显著的杀伤作用，同时分泌较高水平的IFN-γ。并且与RNA-DC相比，Pro-DC的免疫保护作用更加显著。（2）免疫治疗组：Pro-DC和RNA-DC能够诱导有效的抗肿瘤免疫，且Pro-DC的免疫治疗效果优于RNA-DC。综上所述，CT-26肿瘤干细胞裂解物或总RNA负载的DC能够诱导靶向结肠癌干细胞的免疫应答，这为以结肠癌干细胞为靶向的DC疫苗的研究提供了新的思路。