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目的研究SD大鼠各孕期血清及孕晚期胎盘中卵泡抑素样蛋白-3(follistatin-like protein 3,FSTL-3)、缺氧诱导因子1α(hypoxia induc ible factor-1α,HIF-1α)与早发型子痫前期(early-onset preeclampsia,EO-PE)发生的关系。方法将妊娠第4天的SD大鼠,随机分为实验组和对照组,实验组大鼠和对照组大鼠,分别予腹腔注射Nω-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐(NG-Nitroarginine methyl ester hydrochloride,L-NAME)250mg/kg/d(经生理盐水稀释)、生理盐水(与L-NAME同体积),共10天。分别采集两组大鼠孕前、妊娠第6天(孕早期)、妊娠第13天(孕中期)、妊娠第19天(孕晚期)尾静脉血清备用,同期测量两组大鼠尾动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)。收集两组大鼠妊娠第18天24小时尿液,于当天测定尿液中尿蛋白量。于两组大鼠妊娠第19天,麻醉后行剖宫术,取胎盘组织称重后备用。将胎盘组织均分为3组,1组用4%甲醛浸泡,另外2组匀浆后离心,取上清液备用。用酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELI SA),同期测定备用血清、胎盘匀浆液中FSTL-3、HIF-1α浓度。以免疫组化法,定位胎盘中FSTL-3、HIF-1α蛋白表达部位,并用Image pro plus图像分析软件,测定胎盘组织中FSTL-3、HIF-1α蛋白平均光密度值(mean Integrated Optical Density,mean IOD[1]),半定量上述两种蛋白在胎盘中的表达量。以逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR法)测定胎盘匀浆液中,FSTL-3、HIF-1α的信使RNA(message RNA,m RNA)表达情况。将所得出的实验数据进行统计分析。结果自妊娠第6天开始,实验组大鼠尾动脉SBP陆续升高,至妊娠第13天时测得SBP,实验组为(135.80±5.89)mm Hg,对照组为(108.20±4.76)mm Hg,差值>15mm Hg,P<0.05,差异具有统计学意义。实验组大鼠妊娠第18天,24小时尿蛋白量为(4.28±0.54)mg/d,对照组为(0.45±0.12)mg/d,两组对比,实验组明显高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。两组SD大鼠孕前血清FSTL-3浓度值,实验组为(74.89±4.25)pg/ml,对照组为(78.49±15.26)pg/ml;两组孕前血清HIF-1α浓度值,实验组为(17.18±4.56)pg/ml,对照组为(14.87±7.51)pg/ml,两组孕前血清FSTL-3、HIF-1α浓度均无明显差异,P>0.05,差异无统计学意义。两组大鼠妊娠第6天,实验组血清FSTL-3浓度(59.60±12.15)pg/ml,较对照组(88.13±10.63)pg/ml降低,P<0.05,差异有统计学意义;实验组血清HIF-1α浓度(27.20±3.72)pg/ml,较对照组(13.02±2.84)pg/ml升高,P<0.05,差异有统计学意义。两组大鼠妊娠第13天,实验组血清FSTL-3浓度(68.76±8.47)pg/ml,较对照组(93.22±26.55)pg/ml相比,浓度稍有回升,但P>0.05,差异无统计学意义;实验组血清HIF-1α浓度(26.45±3.83)pg/ml,较对照组(11.04±1.67)pg/ml升高,P<0.05,差异有统计学意义。两组大鼠妊娠第19天,实验组血清FSTL-3浓度(55.38±14.45)pg/ml,较对照组(76.44±32.20)pg/ml,P>0.05,差异无统计学意义;实验组血清HIF-1α浓度(24.73±1.27)pg/ml,较对照组(11.26±5.04)pg/ml升高,P<0.05,差异有统计学意义。对照组各孕期血清FSTL-3、HIF-1α浓度值,随机区组设计资料的方差分析,均P>0.05,差异无统计学意义;实验组各孕期血清FSTL-3、HIF-1α浓度值,随机区组设计资料的方差分析,P<0.05,差异有统计学意义。经双变量直线分析,实验组中,大鼠孕期血清FSTL-3浓度的变化情况与SBP负相关,血清HIF-1α浓度变化情况与SBP正相关(pearson系数分别为-0.464、0.051,P<0.05,差异均有统计学意义)。在血压相近的情况下,24小时尿蛋白量越高,血清FSTL-3、HIF-1α浓度升高。在实验组胎盘匀浆液中,FSTL-3、HIF-1α浓度分别为(34.75±5.91)pg/ml、(23.01±3.22)pg/ml,对照组中分别为(10.25±1.99)pg/ml、(2.32±1.30)pg/ml,实验组中FSTL-3、HIF-1α浓度均明显高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义;免疫组化切片中,实验组FSTL-3蛋白表达mean IOD为(190.44±90.37),HIF-1α为(76.87±31.95),对照组FSTL-3蛋白表达mean IOD为(8.66±4.37),HIF-1α为(13.8±7.9)。实验组FSTL-3、HIF-1α蛋白表达mean IOD均明显高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义;胎盘RT-PCR检测中,实验组FSTL-3、HIF-1α的m RNA相对表达量分别为(0.73±0.16)、(0.96±0.14),对照组分别为(0.16±0.09)、(0.45±0.10),实验组高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。结论(1)本实验中,血清FSTL-3浓度与SBP呈负相关,血清HIF-1α浓度与SBP呈正相关,但在血压升高程度相近的情况下,随着24小时尿蛋白量的增加,血清中FSTL-3、HIF-1α浓度均升高。(2)血清FSTL-3、HIF-1α的水平,可能与EO-PE的病情严重程度和病程长短有关。