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母体孕期维生素D状况与胎儿生长发育密切相关，但母体孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联及其机制未完全阐明。因此本课题基于前瞻性出生队列研究，分析母体孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联；分析母体孕期维生素D缺乏对母血叶酸、脐血叶酸和胎盘叶酸转运的影响，并探讨脐血叶酸在母体孕期维生素D缺乏诱发胎儿宫内生长受限中的作用。本研究包括两部分。
1.孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联。
依托中国国家出生队列平台，纳入2017年3月至2018年12月期间，在无锡市妇幼保健院产检和分娩的1193例母婴单胎为研究对象。在孕期不同阶段(孕早期、孕中期、孕晚期)，采集孕妇外周血和收集问卷信息；在分娩期采集配对的母血和脐血及收集新生儿出生信息，并定期监测婴幼儿期(1月龄、3月龄、6月龄、8月龄、12月龄、18月龄和24月龄)体重、身长、头围和牙萌出数量等指标。采用电化学发光免疫分析法检测孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D[25(OH)D]浓度。按血清[25(OH)D]水平分成维生素D缺乏(＜50nmol/L)、不足(50-75 nmol/L)和充足组(≥75nmol/L)。分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D状况和影响因素；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清25(OH)D浓度与出生体重、出生身长和出生头围的关联；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏与早产、低出生体重和小于胎龄儿的发生风险；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏对胎儿宫内和婴幼儿期生长(体重、身长和头围)的影响；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏对婴幼儿生长的增长速度和加速度影响。
结果显示，孕早期、孕中期和孕晚期的母血及脐血血清25(OH)D浓度分别为42.50、44.80、48.88和55.55(nmol/L)；孕早期、孕中期和孕晚期的母血和脐血血清维生素D缺乏率分别为75.0%、63.5%、62.3%和47.8%；与孕期维生素D未补充组相比，补充组孕早、晚期母血及脐血中25(OH)D浓度分别增加4.58、6.30和6.78nmol/L；与春季相比，秋季孕早、中和晚期母血维生素D浓度分别增加3.52、9.78和10.67nmol/L。LOESS曲线拟合分析发现，孕早期和孕晚期的母血及脐血血清25(OH)D浓度与出生体重、出生身长和出生头围均存在线性相关。多元线性回归分析发现，与孕早期和孕晚期的母血及脐血血清维生素D浓度充足组相比，维生素D缺乏组胎儿出生体重分别降低0.18、0.21和0.19kg；出生身长分别降低0.48、0.82和0.62cm；出生头围分别降低0.55、0.69和0.45cm。多元二项式Logistic回归分析发现，与维生素D非缺乏组(≥50nmol/L)相比，孕晚期母血和脐血维生素D缺乏组(＜50nmol/L)早产发生风险分别增加3.42和6.39倍；孕早、晚期母血和脐血维生素D缺乏组低出生体重发生风险分别增加2.85、6.04和3.46倍；孕早和晚期母血维生素D缺乏组小于胎龄儿发生风险分别增加2.12和2.36倍；重复测量方差分析发现，孕早期和孕晚期的母血及脐血血清维生素D缺乏导致胎儿出生时体重、身长和头围降低和男童婴儿早期生长延迟；潜变量二次增长曲线模型分析发现，孕期不同阶段母血血清低25(OH)D浓度降低子代男童婴幼儿期体重、身长和头围的生长速度，但增加其追赶加速度。
2.母体分娩期维生素D缺乏对叶酸水平和胎盘叶酸转运的影响
以出生队列中分娩期产妇和胎儿为研究对象，在分娩期采集配对的母血和脐血，同时收集新生儿出生信息，采用电化学发光免疫分析法检测分娩期母血和脐血血清叶酸水平。分析分娩期母血血清维生素D水平与母血及脐血叶酸水平关联；分析分娩期母血血清维生素D水平对母血及脐血叶酸水平影响；分析分娩期母血血清维生素D状况对叶酸胎盘转运效率(脐血/母血叶酸水平比值)的影响；进一步通过动物、细胞和人群实验研究，分析母体维生素D缺乏对胎盘叶酸转运的影响，包括三个实验。实验一，构建孕期维生素D缺乏小鼠模型，分析母体孕期维生素D缺乏对胎盘叶酸转运泵mRNA和蛋白表达水平的影响；实验二，通过体外细胞实验，分析骨化三醇(活性维生素D3)对人胎盘滋养细胞(HTR8/SVneo)叶酸转运泵mRNA表达水平的影响。实验三，分析孕妇分娩期维生素D缺乏对人胎盘叶酸转运体泵mRNA表达水平的影响。分析脐血叶酸在母体分娩期维生素D缺乏致子代宫内生长迟缓的中介效应。
队列研究发现，分娩期母血和脐血叶酸平均浓度分别为19.28和31.77(nmol/L)，相关分析发现，分娩期母血维生素D水平与母血叶酸水平(r=0.476，P＜0.01)及脐血叶酸水平呈正相关(r=0.338，P＜0.05)。单因素方差分析发现，分娩期母血维生素D缺乏降低母血和脐血叶酸水平，但不影响胎盘叶酸转运效率。体内动物实验研究发现，与对照组相比，母体孕期维生素D缺乏对胎盘叶酸转运泵(pcft和rfc-1)mRNA及蛋白表达水平无明显差异。体外细胞实验研究发现，不同时点(12、24、36)h和不同剂量(10、100、500)nM组之间活性D3对HTR8/SVneo细胞叶酸转运泵(PCFT和RFC-1)mRNA表达水平无明显差异。人群实验研究发现，与对照组相比，孕妇分娩期母血血清维生素D缺乏组胎盘叶酸转运泵(PCFT和RFC-1)mRNA表达水平也无明显差异。中介效应模型分析发现，脐血叶酸水平在母体分娩期维生素D缺乏致子代宫内生长迟缓发挥完全中介效应。
根据以上实验结果，本研究可得出以下结论：
1.孕早期和孕晚期母血及脐血血清维生素D缺乏，不仅降低胎儿宫内生长和增加低出生体重发生风险；而且干扰了男童婴幼儿期生长的速度和追赶加速度。
2.母体分娩期血清维生素D水平与母血和脐血叶酸水平正相关；母体分娩期血清维生素D缺乏虽不影响母血叶酸胎盘转运，但降低母血和脐血叶酸水平；母血和脐血叶酸水平降低可能是母体孕期维生素D缺乏诱发胎儿宫内生长迟缓的机制。
1.孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联。
依托中国国家出生队列平台，纳入2017年3月至2018年12月期间，在无锡市妇幼保健院产检和分娩的1193例母婴单胎为研究对象。在孕期不同阶段(孕早期、孕中期、孕晚期)，采集孕妇外周血和收集问卷信息；在分娩期采集配对的母血和脐血及收集新生儿出生信息，并定期监测婴幼儿期(1月龄、3月龄、6月龄、8月龄、12月龄、18月龄和24月龄)体重、身长、头围和牙萌出数量等指标。采用电化学发光免疫分析法检测孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D[25(OH)D]浓度。按血清[25(OH)D]水平分成维生素D缺乏(＜50nmol/L)、不足(50-75 nmol/L)和充足组(≥75nmol/L)。分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D状况和影响因素；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清25(OH)D浓度与出生体重、出生身长和出生头围的关联；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏与早产、低出生体重和小于胎龄儿的发生风险；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏对胎儿宫内和婴幼儿期生长(体重、身长和头围)的影响；分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏对婴幼儿生长的增长速度和加速度影响。
结果显示，孕早期、孕中期和孕晚期的母血及脐血血清25(OH)D浓度分别为42.50、44.80、48.88和55.55(nmol/L)；孕早期、孕中期和孕晚期的母血和脐血血清维生素D缺乏率分别为75.0%、63.5%、62.3%和47.8%；与孕期维生素D未补充组相比，补充组孕早、晚期母血及脐血中25(OH)D浓度分别增加4.58、6.30和6.78nmol/L；与春季相比，秋季孕早、中和晚期母血维生素D浓度分别增加3.52、9.78和10.67nmol/L。LOESS曲线拟合分析发现，孕早期和孕晚期的母血及脐血血清25(OH)D浓度与出生体重、出生身长和出生头围均存在线性相关。多元线性回归分析发现，与孕早期和孕晚期的母血及脐血血清维生素D浓度充足组相比，维生素D缺乏组胎儿出生体重分别降低0.18、0.21和0.19kg；出生身长分别降低0.48、0.82和0.62cm；出生头围分别降低0.55、0.69和0.45cm。多元二项式Logistic回归分析发现，与维生素D非缺乏组(≥50nmol/L)相比，孕晚期母血和脐血维生素D缺乏组(＜50nmol/L)早产发生风险分别增加3.42和6.39倍；孕早、晚期母血和脐血维生素D缺乏组低出生体重发生风险分别增加2.85、6.04和3.46倍；孕早和晚期母血维生素D缺乏组小于胎龄儿发生风险分别增加2.12和2.36倍；重复测量方差分析发现，孕早期和孕晚期的母血及脐血血清维生素D缺乏导致胎儿出生时体重、身长和头围降低和男童婴儿早期生长延迟；潜变量二次增长曲线模型分析发现，孕期不同阶段母血血清低25(OH)D浓度降低子代男童婴幼儿期体重、身长和头围的生长速度，但增加其追赶加速度。
2.母体分娩期维生素D缺乏对叶酸水平和胎盘叶酸转运的影响
以出生队列中分娩期产妇和胎儿为研究对象，在分娩期采集配对的母血和脐血，同时收集新生儿出生信息，采用电化学发光免疫分析法检测分娩期母血和脐血血清叶酸水平。分析分娩期母血血清维生素D水平与母血及脐血叶酸水平关联；分析分娩期母血血清维生素D水平对母血及脐血叶酸水平影响；分析分娩期母血血清维生素D状况对叶酸胎盘转运效率(脐血/母血叶酸水平比值)的影响；进一步通过动物、细胞和人群实验研究，分析母体维生素D缺乏对胎盘叶酸转运的影响，包括三个实验。实验一，构建孕期维生素D缺乏小鼠模型，分析母体孕期维生素D缺乏对胎盘叶酸转运泵mRNA和蛋白表达水平的影响；实验二，通过体外细胞实验，分析骨化三醇(活性维生素D3)对人胎盘滋养细胞(HTR8/SVneo)叶酸转运泵mRNA表达水平的影响。实验三，分析孕妇分娩期维生素D缺乏对人胎盘叶酸转运体泵mRNA表达水平的影响。分析脐血叶酸在母体分娩期维生素D缺乏致子代宫内生长迟缓的中介效应。
队列研究发现，分娩期母血和脐血叶酸平均浓度分别为19.28和31.77(nmol/L)，相关分析发现，分娩期母血维生素D水平与母血叶酸水平(r=0.476，P＜0.01)及脐血叶酸水平呈正相关(r=0.338，P＜0.05)。单因素方差分析发现，分娩期母血维生素D缺乏降低母血和脐血叶酸水平，但不影响胎盘叶酸转运效率。体内动物实验研究发现，与对照组相比，母体孕期维生素D缺乏对胎盘叶酸转运泵(pcft和rfc-1)mRNA及蛋白表达水平无明显差异。体外细胞实验研究发现，不同时点(12、24、36)h和不同剂量(10、100、500)nM组之间活性D3对HTR8/SVneo细胞叶酸转运泵(PCFT和RFC-1)mRNA表达水平无明显差异。人群实验研究发现，与对照组相比，孕妇分娩期母血血清维生素D缺乏组胎盘叶酸转运泵(PCFT和RFC-1)mRNA表达水平也无明显差异。中介效应模型分析发现，脐血叶酸水平在母体分娩期维生素D缺乏致子代宫内生长迟缓发挥完全中介效应。
根据以上实验结果，本研究可得出以下结论：
1.孕早期和孕晚期母血及脐血血清维生素D缺乏，不仅降低胎儿宫内生长和增加低出生体重发生风险；而且干扰了男童婴幼儿期生长的速度和追赶加速度。
2.母体分娩期血清维生素D水平与母血和脐血叶酸水平正相关；母体分娩期血清维生素D缺乏虽不影响母血叶酸胎盘转运，但降低母血和脐血叶酸水平；母血和脐血叶酸水平降低可能是母体孕期维生素D缺乏诱发胎儿宫内生长迟缓的机制。