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目的宫颈癌患者术后淋巴结状态是预后的重要因素,部分早期宫颈癌患者无淋巴结转移仍会出现复发,这表明隐匿性微转移的存在,为此本研究联合检测宫颈癌的特异性标志物高危型(High risk, HR)HPV16/18和肿瘤特异标志物端粒酶活性预测宫颈癌的淋巴结微转移,并探讨其临床意义。方法收集2005年一2007年在安徽省立医院妇产科行广泛性全子宫切除和盆腔淋巴清扫术,且术后常规病理报告无淋巴结转移的61例早期宫颈癌原发灶和淋巴结,同时选取13例早期宫颈癌术后常规病理报告有转移的淋巴结作为阳性对照,15例因良性胃溃疡行胃部分切除患者的淋巴结作为阴性对照,分别应用荧光定量(Fluorescent quantitation, FQ)PCR方法检测HPV16/18-DNA拷贝数和PCR-ELISA方法检测端粒酶活性,并与免疫组化方法检测细胞角蛋白(Cytokeratin, CK)19检测淋巴结微转移作比较,评价应用FQ-PCR方法检测HPV16/18-DNA和PCR-ELISA方法检测端粒酶活性的应用价值。结果1. 61例常规病理阴性的淋巴结经免疫组化检测CK19,发现11例阳性,阳性率18.0%,其中有9例为HPV16或HPV18-DNA阳性,10例为端粒酶活性表达阳性。2. 61例宫颈癌患者经联合检测HPV16/18-DNA和端粒酶活性,发现17例(27.9%)微转移,其中12例同时为HPV16/18-DNA和端粒酶活性表达阳性,另有3例仅HPV16/18阳性,2例仅端粒酶表达阳性;13例常规病理检查阳性的淋巴结HPV16/18和端粒酶均为阳性,而15例良性胃溃疡患者的淋巴结两者均为阴性。联合HPV16/18-FQ-PCR和端粒酶-PCR-ELISA检测微转移,阳性率高于免疫组化检测CK-19法(χ2=4.17, p<0.05);微转移阳性的淋巴结中端粒酶表达与HPV阳性呈显著正相关(r=0.61,p<0.01)。3.微转移阳性的淋巴结HPV16/18拷贝数低于常规病理检查阳性的淋巴结(103.38±0.78 vs 104.79±0.62),而后者又低于原发灶(106.65±0.79),组间比较差异有统计学意义(p<0.01;p<0.01)。4.微转移阳性的淋巴结端粒酶活性表达低于常规病理检查阳性的淋巴结(0.31±0.08 vs 0.43±0.15),而后者又低于原发灶(0.74±0.29),组间比较差异有统计学意义(p<0.05;p<0.01)。5.与免疫组化方法检测CK19检测淋巴结微转移比较,计算出单独利用FQ-PCR检测HPV16/18-DNA和PCR-ELISA检测端粒酶活性表达的的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为81.8%、88.2%、60.0%、95.7%和90.9%、92.0%、71.4%、97.9%;两者联合检测的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为100%、88.2%、64.7%、100%。联合检测HPV16/18和端粒酶活性可提高淋巴结微转移的检出率,并降低假阳性率。6.宫颈癌淋巴结微转移与临床分期、肿瘤大小、肿瘤浸润深度和宫旁浸润与否有关(p<0.05),但与患者年龄、组织类型和肿瘤细胞分化程度无关。结论利用FQ-PCR检测HPV16/18和PCR-ELISA检测端粒酶活性可检测常规病理检查遗漏的宫颈癌的淋巴结微转移,两者联合检测可提高微转移的检出率。对常规检查淋巴结为阴性的宫颈癌,微转移检测可能对指导术后辅助治疗、判断预后有积极临床意义。