玫瑰茄的质量控制及降脂活性的初步研究

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玫瑰茄属于锦葵科木槿属一年生草本植物,是一种药食两用植物。其花萼为紫红色,艳丽自然,富含人体所需要的各种营养成分和活性物质,如维C、蛋白质、有机酸、天然色素以及多种氨基酸等,具有抗肿瘤、抗氧化、降血压、降血脂、保肝和通便利尿等多种药理活性。  本文主要对玫瑰茄的提取工艺、质量控制及降脂活性等方面进行了初步研究,主要研究内容及结果如下:  1、玫瑰茄提取工艺的研究  (1)通过紫外-可见光全波长扫描确定玫瑰茄提取物的最佳检测波长为280nm。  (2)研究玫瑰茄的最佳提取工艺条件,以玫瑰茄中花色苷的含量作为评价指标,利用pH示差法对花色苷进行含量测定。通过单因素试验和正交试验,确定玫瑰茄的最佳提取工艺参数,考察的3个影响因素对提取效果的影响程度依次为:溶剂用量>提取次数>提取时间。表明溶剂用量对玫瑰茄的提取效果影响最大,其次为提取次数,再次是提取时间。最终确定其最佳提取工艺条件为:溶剂用量为1:15,提取次数为3次,提取时间为1小时,此工艺条件下提取的总花色苷含量为498mg/ml。  2、玫瑰茄的质量控制研究  (1)利用比色法和紫外-可见分光光度法对玫瑰茄干花萼中的主要成分进行分析测定,结果显示五批玫瑰茄干花萼中花色苷、多酚、黄酮和总糖的平均含量分别为8.96mg/100g、454.00mgGAC/100g、394.96mgRu/100g和4271.87mgGlu/100g。  (2)采用高效液相色谱法对玫瑰茄提取物主成分进行含量测定,建立了快速、高效的主成分含量测定方法。  ①内标选取物的确定:玫瑰茄花萼中含有的花色苷类主要是飞燕草素-3-接骨木二糖苷和矢车菊素-3-接骨木二糖苷,还有少量的飞燕草素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷等。市场上出售的飞燕草素-3-接骨木二糖苷和矢车菊素-3-接骨木二糖苷的对照品本身昂贵,不易得到,故想到以内标法对其进行测定。内标物选取时以内标物的选取原则为指导,以拟定的含量测定方法,选取内标物。结果显示,橙皮苷在色谱分析条件下,与样品中各组分的分离度良好,故选定橙皮苷作为内标物。  ②含量测定法高效液相色谱系统:安捷伦HP1260液相系统;色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6×250mm,5μm);流动相为0.1%的甲酸和乙腈;流速为1.0ml/min;检测波长280nm;进样量10μl。测定结果表明,在拟定的色谱条件下,该方法耐用性和专属性均良好;线性关系良好,回归方程为:Y=14.204+18487X(mg/ml),(R=0.99998,n=6);定量限为3.592ng,进样精密度试验RSD为0.21%;室温下玫瑰茄溶液连续放置12小时内的RSD值为0.34%,说明溶液稳定;重复性试验RSD为0.82%;中间精密度试验RSD为1.22%;按1:1加入量测得的样品回收率为98.9%,RSD为0.29%,回收率良好。样品测定测得的五批玫瑰茄主成分含量分别为五批玫瑰茄样品中主成分的含量为分别为0.18%、0.38%、0.10%、0.08%和0.31%。  (3)降脂活性的研究  通过腹腔注射蛋黄乳构建急性高血脂模型,通过喂食高脂饲料构建慢性高血脂模型,观察玫瑰茄水煎液对小鼠急、慢性高血脂模型血清中甘油三酯(TG)及总胆固醇(CHO)含量的影响。结果表明与对照组相比,玫瑰茄水煎液组小鼠血清TG及CHO水平显著降低。说明小鼠急、慢性高血脂模型构建成功,玫瑰茄水煎液可以降低小鼠急、慢性高血脂模型血清中TG及CHO的水平。  本课题在单因素实验的基础上通过正交试验设计方案对玫瑰茄的提取工艺进行优化,运用紫外及高效液相色谱的方法对其质量控制方面进行研究,以及对其降脂活性进行研究,为将来玫瑰茄的应用与开发提供了一定的研究基础。
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