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头孢喹肟(cefquinome, CEF)属于第四代头孢菌素,为动物专用,具有广泛的抗菌谱,抗菌活性强,无肾毒性,吸收和消除也较快。目前上市剂型一般仅为注射剂,剂型较为单一。CEF是一种时间依赖型药物,且半衰期较短,需要连续多次给药才能在动物体内保持有效血药浓度。微球(microspheres)是以某些生物可降解的高分子化合物材料为载体,将药物进行包裹或吸附成球,进而转运到特定的生物学部位,按照特定的速率将药物释放出来的一种药物剂型。明胶是一种天然的微球载体材料,本课题研究以明胶为载体,将CEF制成明胶微球(Gelatin Microspheres, GMS),从而延长CEF在动物体内的作用时间,减少临床用药次数,提高药物杀菌作用。在CEF-GMS制备过程中,首先进行空白GMS的制备。通过单因素试验确定对空白GMS制备起主要影响的4个因素,包括搅拌速度、W/O、乳化剂(Span-80)浓度和明胶浓度。将上述4个因素按L9(34)正交表进行正交试验,通过极差分析结果确定各因素的最优组合,并确定各因素影响的主次顺序为：明胶浓度、搅拌速度、W/O、乳化剂浓度。在空白GMS最佳制备工艺的基础上进行CEF-GMS的制备。设置CEF加药量与明胶的不同比例,按照空白GMS的制备方法操作。对形态、外观、粒径、粘连度及载药量和包封率等各项指标进行考察,选择出CEF-GMS的最佳制备工艺为：精确称取明胶0.3g, PEG60000.03g,硫酸头孢喹肟原料药(以CEF计0.1g)溶于3mL水中,置于50℃水浴温度下预热混匀,即为水相。用量筒量取50mL液体石蜡,置于500mL圆底烧瓶中,加入2mL Span-80混合均匀作为油相,将烧瓶置于与水浴温度相同温度的磁力搅拌器上,预热均匀后,用注射器将2.5mL水相逐滴滴加入搅拌着的油相中,在1000r/min转速下,乳化15min,转为冰浴。当温度稳定在1-5℃之后,将3mL戊二醛以30滴/min的速度滴入体系中,交联持续90min。交联结束后,向体系中加入20mL异丙醇,脱水30min。之后依次用异丙醇、乙醚、石油醚洗涤体系中的油相及过量戊二醛,将得到的固体转移到干燥器中,经循环水真空泵抽真空,干燥24h,即得到CEF-GMS,转入干燥安瓿瓶中密封保存。在最佳制备工艺下制备的CEF-GMS,形态圆整、规则,微球表面有微孔结构存在。在光学显微镜下对微球的粒径和粘连度进行统计,CEF-GMS平均粒径为(9.15±0.59)μm,粘连度较小,为13.23%±0.76%,粒径分布在0-30μm的微球占92.45%⒈±1.32%。对CEF-GMS中的CEF含量进行了HPLC测定,计算出CEF-GMS的载药量为(37.89±1.34)mg/g,包封率为81.73%±2.10%。将CEF-GMS与硫酸头孢喹肟原料药按照4.0mg/kg-bw(以CEF计)剂量对猪进行肌内注射,在各时间点采集到的血浆样品加入10%高氯酸,振荡离心沉淀,取上清液进行HPLC分析,方法的绝对回收率在80%以上,准确度和精密度的考察达到了测定要求。色谱条件如下,色谱柱：Agilent SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相：乙腈-0.1mol/L乙酸盐缓冲液(11：89)pH4.0；流速：10.mL/min;检测波长：270nm；进样量：20μL；柱温：(30±0.1)℃,在此条件下,药物色谱行为良好。根据AIC和WSS最小的原则进行房室模型的模拟,均符合有吸收二室模型。CEF-GMS拟合方程分别为C=3.1838e-0.1642t+0.7556e-0.0154t-3.9394e-0.6505t; CEF原料药拟合方C=9.5331e-0.6644t+2.1314e-0.1495t-11.6645e-2.7525t。用所建立的测定方法,对微球组和原料药组的药动学参数进行分析、计算和比较。CEF原料药与CEF-GMS主要药动学参数如下：T1/2。分别为(1.044±0.27)h和(4.22⒈±0.37)h；T1/21β分别为(4.644±1.22)h和(45.12±5.60)h; T1/2ka分别为(0.25±0.05)h和(1.07±±0.14)h；Tp分别为(0.74±0.11)h和(3.20±0.98)h; Cmax分别为(6.22±1.94)μg/mL和(2.11±0.61)μg/mL;AUC分别为(24.38±3.65)μg·h/mL和(62.51±7.35)μg·h/mL;CL(s)分别为(0.24μ0.07) L/(kg·h)和(0.06μ0.02)L/(kg·h); V/F(c)分别为(0.51±0.18)(mg/kg)/(μg/mL)和(0.76±0.35)(mg/kg)/(μg/mL)。证明药物制成微球制剂后,在动物体内的吸收、分布和消除时间均明显延长,CEF-GMS具有良好的缓释效果。