背景和目的 现已明确，幽门螺杆菌感染(Helicobacter pyroli，Hp)是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的主要病因，与胃癌和粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的发生密切相关，1994年WHO已将Hp列为Ⅰ级致癌原。据初步统计，全世界超过50％的人群有Hp感染。其中西方国家的感染率为25-50％，发展中国家有的高达80％。然而，Hp感染人群大都无症状，只有少数感染者可出现消化性溃疡，极少数感染者最终发展成胃癌，其中的原因尚不清楚。目前认为除与宿主基因易感性，环境因素有关外，更重要的是Hp菌株的毒力差异对临床结果的影响。目前，Hp的cagA、vacA、iceA基因受到研究者的重视。许多流行病学调查资料显示，cagA基因阳性的Hp菌株感染与消化性溃疡、肠化生、萎缩性胃炎和胃癌的发生密切相关。编码空泡毒素的vacA基因存在于所有的Hp菌株中，其信号序列(s)和中间序列(m)变异较大，s和m均存在许多亚型，其中s有sla，slb，slc，s2亚型，m有mla，mlb，mlb-m2，和m2亚型。不同s和m亚型组成的嵌合体使Hp产生的空泡毒素的量和活性也不同。研究发现vacA s1／m1型的Hp产生大量毒素，可能与消化性溃疡相关，vacA s1／m2型的Hp产生中等量毒素，而vacA s2／m2型的Hp则产生少量毒素或不产生毒素。Hp的iceA基因是近来发现的一个新基因，有iceA1和iceA2两个等位基因，来自荷兰和美国的几项研究显示iceA1与消化性溃疡和胃粘膜IL—8水平有显著相关性，被认为可能是Hp 扣们扯；。x穿。。。。。。＠的又一致病因子。本研究的目的是研究浙江地区幽门螺杆菌临床分离株中cagA、vacA、iceA各基因的存在情况并分析各基因与胃十二指肠疾病的关系。 材料和方法 共从浙江地区门 例胃十二指肠疾病患者的胃劲膜活检组织中分离培养出 Hp。其中浙医H院 49例，岱山县人民医院 67例。116例患者中慢性浅表性胃炎31例，慢性萎缩性31例，糜烂性胃炎18例，消化性溃疡30例，胃癌6例。将胃十H指肠疾病患者的胃猫膜活检组织研磨后涂布于ECY选择性培养基上，37℃，微需氧（5％OZ、10％COZ和 85％N。）环境中培养 5天后，经系统鉴定（菌落特征／快速尿素酶实验、氧化酶实验、形态及染色特性）确认为Hp者，进一步传代培养 2天扩增细菌。用标准酚／氯仿抽提法提取 Hp的基因组DNA，根据文献报道的引物，进行PCR扩增（95OC预变性3min后，94℃变性45s，54”C退火45s，72”C延伸45s，共30个循环，再于72’C延伸7min），用琼脂糖凝胶电泳法将 PCR产物进行电泳以检测 HP临床分离株的 cagA、vacA、iceA各基因的阳性情况。各基因与疾病的关系的分析采用 X‘检验，P＜0刀5认为有统计学意义。 结果和讨论 Hp菌株各基因 PCR扩增产物大小均与报道的一致。116例临床分离的 Hp中，cagA基因的阳性率为 100％（if6／11卜 vacAsla基因的阳性率为gi．4％（106／116），vacAinZ基因型 Hp占 59．5％（69／if6），vacAInlb基因型 Hp占12．l％（14／if6），vacAsla／InZ基因型组合的 Hp占 54．3％（63／if6），vacAsla／mlb基 因型组合的彻占12．lO（l／116），另外，vacAnllb和vacAInZ 均阳性的菌株占ZI．6 ％（25／116），还有 6．9％（8／116）的菌株不能用 vacAJnlb和 vacAInZ分型。iceAl 基因的阳性率为66．4％（7／11 6），iceAZ基因的阳性率为6．9％（／11 6），另有15．5％ （18／116）的菌株iceAl和iceAZ基因均阳性，而iceAl和iceAZ基因均阴性的菌 株占 11．2％（13／116人 因此，浙江地区 Hp 临床分离株的基因型以 cagAvacAs a／InZ，iceAl为主。在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、糜烂性胃炎、 消化性溃疡和胃癌各疾病组中，cagA、vacA、iceA各基因的阳性情况均无统计学 差异。提示 cagA、vacA、iceA基因不能作为浙江地区 Hp菌株毒力强弱的指标。 结论 浙江地区幽门螺杆菌的基因型以 cagA，vacAslJmZ，iceAl为主。用gA、 vacA、iceA各基因不能作为浙江地区幽门螺杆菌菌株毒力强弱的指标。