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目的观察清热化痰活血方药对Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展的影响及其机制是否与泛素蛋白酶体通路相关。方法Apo E基因敲除小鼠160只自8周龄时予以高脂饮食,主要成分为:脂肪21%(wt/wt)、胆固醇0.15%(wt/wt),随机分为高脂对照组(40只)和清热祛瘀颗粒组(120只),其中,清热祛瘀颗粒组再随机分为清热祛瘀颗粒大剂量组(40只)、中剂量组(40只)、小剂量组(40只),分别给予生理盐水 10mg/kg·d、清热祛瘀颗粒 540mg/kg·d、180mg/kg·d、60mg/kg·d;每组再分为给药5周和给药22周的亚组(每组20只),各组自由饮水饮食。分别评估清热祛瘀颗粒大、中、小剂量对早期和中期主动脉斑块形态学的影响。依据评估结果,选取最佳药物组剂量与对照组比较,分别用HE染色观察主动脉病理形态学改变,Western Blot法测定NF-κ B P65亚基的表达,免疫组化法测定ICAM-1、MMP9、CD40L的表达,免疫荧光法测定泛素、蛋白酶体的表达。结果形态学结果显示清热祛瘀颗粒中剂量组与大剂量组、小剂量组相比抑制动脉粥样硬化的进展的作用更为明显,清热祛瘀颗粒中剂量组早期斑块的内中膜厚度与大剂量组、小剂量组相比明显降低(P<0.01),中期斑块的脂核含量明显减少(P<0.01);清热祛瘀颗粒中剂量组与对照组比较,泛素、蛋白酶体、NF-κ B的P65亚基的表达均显著降低(P<0.01)。给药5周后,清热祛瘀颗粒中剂量组与对照组比较ICAM-1的表达显著降低(P<0.01);给药22周后,清热祛瘀颗粒中剂量组与对照组比较,MMP9、CD40L的表达均显著降低(P<0.01)。本研究从量效、时效两个方面探索了中药清热化痰活血配伍方药稳定动脉粥样硬化易损斑块的作用机制与泛素-蛋白酶体通路之间的关系。一方面,在中药量效的研究部分发现中药清热化痰活血配伍方药的作用并非剂量依赖性的升高,而是存在最佳剂量,即中药的治疗作用存在量效之间的关系,并不是简单意义上的剂量依赖关系。在本研究结果中观察到清热化痰活血方药的中剂量作用更佳,小剂量及大剂量的作用相对中剂量而言作用稍差。另一方面,发现了中药清热化痰活血配伍方药稳定动脉粥样硬化易损斑块的作用机制与泛素-蛋白酶体通路之间具有密切的相关性。泛素-蛋白酶体通路在斑块发展过程中起着重要作用,清热化痰活血方药可能是通过调节泛素-蛋白酶体通路发挥抑制斑块进展的作用。结论清热祛瘀颗粒组可以显著降低斑块炎症因子的表达,减少脂核含量,抑制动脉粥样硬化的进展,其机制与抑制泛素蛋白酶体通路有关,泛素-蛋白酶体可能是中药稳定易损斑块作用的一个新靶点。