手掌参多糖对单核-吞噬细胞功能的影响

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手掌参(Gymnadenia conopsea R.Broyn)为兰科(Orchidaceae)手参属(Gymnadenia R.Br.)多年生草本植物的干燥块茎,蒙药名“额日赫腾乃一嘎日”,藏药名“藏旺拉”,中药名“佛手参、掌参、手儿参”,补肾健脾、止咳平喘、行气血止痛等功效,临床上主要用于肺肾气阴两虚所致的虚喘、腰腿酸软等疾病的治疗。研究表明,手掌参活性成分具有抗氧化、抗过敏、延缓衰老、改善记忆及对神经元损伤保护作用。本研究以手掌参多糖为研究材料,小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)为研究对象,采用CCK-8、EA/YC、中性红、Griess、ELISA等方法,探讨手掌参多糖对巨噬细胞毒性/增殖能力、Fc/C3b受体功能、吞噬功能、分泌功能(NO、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ、LZ)的影响;以手掌参多糖为研究材料,小鼠腹腔巨噬细胞J774A.1为研究对象,采用Hoechst/PI染色结合ELISA法,研究手掌参多糖对LPS+ATP诱导体系巨噬细胞焦亡(Caspase-1、Caspase-3、IL-18、IL-1β)的影响。取得的研究结果如下:1.质量浓度0.625 mg/mL~10 mg/mL的手掌参多糖具有促进巨噬细胞增殖和吞噬的作用,浓度10 mg/mL,细胞增值率最大124.83%,吞噬率最大113.11%。2.质量浓度0.625 mg/mL~10 mg/mL的手掌参多糖具有抑制LPS巨噬细胞吞噬功能增强的作用、促进HCSS巨噬细胞吞噬功能降低的作用,表明出良好的机能双向调节作用。3.质量浓度0.625 mg/mL~10 mg/mL的手掌参多糖对巨噬细胞Fc/C3b受体活性具有促进作用(YC、EA花环率分别为67.83%、45%),表明手掌参多糖具有增强巨噬细胞免疫粘附功能。4.质量浓度0.625 mg/mL~10 mg/mL的手掌参多糖具有促进巨噬细胞分泌NO、TNF-α、IL-1β、LZ、IFN-γ的作用并表现出良好的正效量效关系,降低活化巨噬细胞分泌功能表现出良好的机能双向性特点。5.质量浓度0.625 mg/mL~10 mg/mL的手掌参多糖具有不同程度的抑制由LPS+ATP诱导的巨噬细胞焦亡的作用(抑制细胞分泌Caspase-1、Caspase-3、IL-1β、IL-18),2.5mg/mL时抑制Caspase-1释放量的效果最好,5mg/mL时抑制Caspase-3、IL-1β、IL-18释放量的效果最好。本研究结果表明:手掌参多糖通过增强巨噬细胞Fc/C3b受体活性以增强巨噬细胞的免疫粘附能力和吞噬能力,促进巨噬细胞分泌以调节机体的免疫功能,抑制活化巨噬细胞分泌和焦亡的产生以增强机体的抗炎能力,研究结果为手掌参多糖的进一步开发利用提供了研究材料和科学依据。
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