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玛咖酰胺和玛咖烯被看作是玛咖中特有的活性成分,其含量的高低被用来评价玛咖质量的好坏。近年来,超高效液相色谱质谱联用(UPLC–MS)技术在分析玛咖酰胺和玛咖烯中得到广泛的应用。玛咖酰胺具有多种活性,如提高生育能力、改善性功能、促进细胞增殖、抗骨质疏松、保护神经、抗氧化、抗癌等。据我们所知玛咖烯的活性却没有单独的报道。因此,将玛咖酰胺和玛咖烯进行分离,单独的研究他们的生物活性具有重要意义。本文首先报道了采用新的UPLC–MS方法对玛咖中玛咖酰胺和玛咖烯的定性定量分析;然后报道了玛咖中粗提物的分离、分析及玛咖酰胺和玛咖烯生物活性的研究;最后报道了单宁酸(TA)作为电喷雾电离质谱(ESI–MS)新型校正物的研究。主要内容如下:(1)鉴于UPLC–MS可使分离、定性、定量很好的结合,本文建立了一种用于分析玛咖酰胺和玛咖烯的等度洗脱UPLC–MS。采用精密度试验,样品溶液稳定性试验,线性关系、检测限(LOD)和定量限(LOQ),样品重复性试验及加标回收试验对该方法的适用性进行了评价。结果表明:所用仪器精密度良好能够满足本实验的要求;样品溶液稳定性好;所用方法得到的峰面积和浓度之间存在良好的线性关系;该方法的重复性和准确度良好。在此基础上,采用该法对云南丽江、香格里拉、会泽以及秘鲁等4个产地产的黑、黄、紫三种颜色玛咖中玛咖酰胺和玛咖烯的含量进行分析。(2)采用硅胶柱层析法对玛咖粗提物(MCE)依次用石油醚、乙酸乙酯萃取,用石油醚—乙酸乙酯洗脱剂进行分离、纯化,采用UPLC–MS、红外吸收光谱(FT–IR)、紫外–可见吸收光谱(UV–Vis)对分离物总玛咖酰胺(TMM)和总玛咖烯(TME)进行表征。结果表明,采用硅胶柱层析法可使MCE中的TMM与TME得到很好的分离。(3)采用DPPH·清除能力、ABTS·清除能力和铁还原能力等评价了MCE、TMM和TME的抗氧化性;采用MTS法(2–对磺酸基苯基–3–(4,5–二甲基噻唑)–5–(3–羧甲氧基苯基)–二氢四唑嗡盐法)评价了它们抗白血病HL–60、肺癌A549、肝癌SMMC–7721、乳腺癌MCF–7以及结肠癌SW480等的抗癌活性。结果表明:TMM有较高的自由基清除能力和还原能力,TME的抗氧化活性最弱;TMM对五株癌细胞(白血病HL–60、肺癌A549、肝癌SMMC–7721、乳腺癌MCF–7和结肠癌SW480)的增殖也有很好的抑制作用,其中玛咖酰胺N–苄基–(9Z,12Z,15Z)–十八碳三烯酰胺(NBOT)细胞毒性抑制活性最强。(4)TA的正离子模式的ESI质谱在质荷比(m/z)371.0368–1739.1169范围内呈现正态分布。基于这一事实,采用TA作为ESI–MS校正物对质谱进行分子量校正后,通过分析4种玛咖酰胺和2种β–环糊精,比较了TA作为校正物与甲酸钠(SF)和Prod#88323分别作为校正物分析结果的相对误差。结果表明:使用TA校正后测量的分析物m/z的相对误差不超过3.00 ppm,小于SF和Prod#88323校正后测得样品m/z的相对误差。该校正液的发现,为准确检测m/z<2000的化合物提供了科学的依据。