糖胺聚糖主要存在细胞外基质和细胞膜,是重要的生物大分子,在很多肿瘤组织中,均发现糖胺聚糖的含量、组成、分子大小及分子结构与相应的正常组织有明显差异,其中有些差异对肿瘤预后有明显影响。但在同一肿瘤的不同组织学类型以及同一组织学类型肿瘤细胞的不同分化程度之间,糖胺聚糖的差异是否依然存在目前尚知之甚少。因此,本论文的目的在于探讨肝癌组织的不同组织学类型之间,以及肝细胞癌的不同分化程度之间糖胺聚糖的含量、组成、相对分子量及二糖组成的差异。本论文第一章建立了从少量肝组织中微量分离纯化糖胺聚糖的方法。采用胰蛋白酶及中性蛋白酶两步酶解法提取糖胺聚糖,采用透析、阳离子交换法、凝胶过滤法及阴离子交换法纯化,成功地从1克新鲜猪肝组织中分离纯化得到100～200微克硫酸乙酰肝素,所得的制品经薄层色谱检查不含蛋白质,经醋酸纤维素薄膜电泳法检查不含其它糖胺聚糖成分,表明该法可用于少量组织中微量糖胺聚糖的分离和纯化中。本论文第二章建立了糖胺聚糖的微量结构分析方法。分别比较了化学降解法及酶解法降解糖胺聚糖效果的差异,并对酶解法得到的不同二糖采用高效液相离子色谱法进行分离,并比较了2-氨基苯甲酰胺荧光标记法标记前后检出限量的差别,将糖胺聚糖二糖分析方法的灵敏度提高到100pg以下。并对经分离纯化得到的猪肝组织硫酸乙酰肝素的二糖组成进行分析,发现与猪内肠组织硫酸乙酰肝素有明显差异,证明了二糖组成分析是比较不同来源糖胺聚糖细微结构差异的良好方法。本论文第三章采用组织学方法,以Edmondson组织病理学诊断标准,对肝癌组织进行了病理学诊断,并将肝癌组织分为肝内胆管癌、高分化肝细胞癌、中分化肝细胞癌及低分化肝细胞癌四组,为从事不同肝癌组织中糖胺聚糖的结构差异比较提供了前提。本论文第四章采用已建立的分离纯化及结构分析的方法对不同肝癌组织中糖胺聚糖的差异进行了比较。研究发现,肝内胆管癌中透明质酸水平显著增高,而肝细胞癌中透明质酸仅轻度增高。随着肝细胞癌中肿瘤细胞分化程度的降低,硫酸软骨素含量及相对比例均逐步增高,而硫酸乙酰肝素相对比例逐步降低,且低分子量糖胺聚糖比例也增高,尤其各糖胺聚糖中非硫酸化二糖比例也随着分化程度的降低而逐步增高。本论文首次发现了在同一肿瘤的不同组织学类型之间,各糖胺聚糖的细微结构存在差异,且同一肿瘤同一种组织学类型中,由于肿瘤细胞的分化程度不同而使糖胺聚糖的数量和结构产生差异。这些差异为从糖胺聚糖代谢的角度阐明肝癌的发生和发展提供了有用信息。