【摘 要】
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趋化因子(chemokine)是一类小分子物质,有诱导体内白细胞运输的功能。BLC(B-lymphocyte chemoattractant,BLC)是一种CXC类趋化因子,有选择性吸引B淋巴细胞,并对部分T细胞也有
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趋化因子(chemokine)是一类小分子物质,有诱导体内白细胞运输的功能。BLC(B-lymphocyte chemoattractant,BLC)是一种CXC类趋化因子,有选择性吸引B淋巴细胞,并对部分T细胞也有趋化作用。研究呈示BLC与机体特异免疫应答产生有密切关系。目前有关BLC进行肿瘤治疗的研究尚未见报告。本研究的目的是构建一个含有BLC的真核表达载体,通过转染技术导入肿瘤细胞,获得BLC修饰的肿瘤细胞疫苗,进一步研究BLC修饰的肿瘤疫苗的抗肿瘤作用机制。 首先以小鼠脾脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增BLC全长cDNA,并克隆入pcDNA3.1(+),构建真核表达的重组质粒。重组子经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定确有所需目的基因。用脂质体转染技术把重组质粒分别导入CT26细胞、LL/2细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株。通过RT-PCR、免疫印迹法(Western Blot)检测稳定转化株表达BLC的情况,并用趋化实验检测BLC的生物学功能。结果表明稳定转染pcDNA-BLC的肿瘤细胞能高表达具有生物学活性的BLC。 采用动物实验方法研究BLC修饰的肿瘤细胞疫苗抗小鼠肿瘤作用。我们建立了BALB/c小鼠结肠癌(CT 26)和C57BL/6小鼠肺癌(LL/2)
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