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树枝状高聚物聚酰胺-胺（Polyamidoamine, PAMAM）为近年来开发的一类三维的高度支化的树枝状高分子,具有单一分散性,无免疫原性,细胞毒性较低,生物可降解等特性,作为药物载体能够增加药物皮肤渗透系数,延长角膜滞留时间,从而增加药物的生物利用度,课题组前期研究表明PAMAM可以增加葛根素离体角膜渗透性。是一种颇具发展潜力的新型眼部药物载体。微渗析（microdialysis）技术是近年来开发的一种以透析原理为基础,在组织细胞间隙测定内源性和外源性物质的在体取样技术。该技术具有大量实验动物模型无可匹敌的优点。例如,微渗析技术对动物组织的损伤小;使得同时在同一动物体内监测靶组织和血液药物浓度成为可能;自身做对照,减少了实验误差及实验动物数;具有连续、不间断取样特性,真正做到了对组织中的药物进行实时监测等。已经在药代动力学研究方面得到广泛的应用。本论文以葛根素（Puerarin, PUE）为模型药物,建立兔眼部微渗析模型,采用LC-MS/MS检测方法,考察了不同代数的PAMAM对于PUE眼部吸收的影响,为PAMAM成为眼部药物给药载体提供依据。一、建立了基于MAB/3型探针的兔眼部微渗析模型,并对探针体内外回收率进行考察,探针体内外回收率分别为（16.25±1.13）%、（30.16±0.49）%。建立了眼部房水中PUE测定的LC-MS/MS检测方法,优化的质谱条件为ESI离子源;负离子扫描模式,选择离子监测方式;多反应检测;色谱柱:C18,（Phenomenex Luna,150 mm×2.1 mm i.d.,5μm）;流动相:乙腈-0.2 mmol·L-1醋酸铵水溶液（40:60）;流速:0.2 mL·min-1;运行时间:5min;喷雾电压:3.0 kV;毛细管温度:350℃;鞘气压:30 kPa;辅助气流速:5 arb;碰撞电压:25 eV;m/z 415.0→295.0（葛根素）,m/z 449.1→285.0（落新妇苷,内标）。使用Xcalibur version 1.4.1软件处理数据。葛根素在兔房水渗析液中标准曲线的线性范围为21000 ng·mL-1,最低定量限为2 ng·mL-1,方法提取回收率为79%～86%,低、中、高三个浓度(2,50,1000 ng·mL-1)的日内和日间精密度（RSD）均小于10%。方法专属性好,灵敏度高,因此本方法满足渗析液样品测定要求,可用于葛根素的眼部药代动力学研究。二、采用建立的兔眼部微渗析模型,分别考察了PUE（1%,w/v）及不同代数PAMAM（0.2%,w/v）与PUE混合后的眼部药物动力学。结果表明G3.0,G4.0,G5.0 PAMAM-PUE混合组葛根素的药-时曲线下面积分别为PUE组的2.3,3.5,2.1倍,峰浓度分别为PUE的1.5, 2.5和1.3倍,达峰时间也延长。提示随着PAMAM代数的增加,葛根素的房水峰浓度和相对生物利用度也明显增高。但是G5.0 PAMAM-PUE混合组却较G3.0,G4.0 PAMAM-PUE混合组低。原因可能是G5.0 PAMAM能够包覆更多葛根素,导致游离葛根素较少,导致角膜透过较慢,但是半衰期却有所延长。综上所述,兔眼部微渗析研究表明,PAMAM能够不同程度的增加葛根素的眼部吸收,改善葛根素的眼部生物利用度,且具有一定的代数依赖性。因此,PAMAM有潜力成为一种新型的眼部药物载体。