B-葡萄糖苷酶(B—glucosidase，EC 3.2.1.21，简称bgln)在纤维素的酶水解过程中为最后一步关键酶，不仅能够水解白藜芦醇苷为白藜芦醇，还能够作用于细胞壁碎片等其它细胞组成，从而生成更多的白藜芦醇。 本研究以含有从黑曲霉中获得的编码bgln成熟肽的cDNA的克隆质粒pMD19-bgln为模板，应用PCR技术扩增出2600bp的bgln基因片段，利用真核表达载体pVT102U/a构建pVT102U/a-bgln重组质粒，并通过电穿孔法将其转化到酿酒酵母菌S78中，目标是获得能够高效分泌B-葡糖苷酶的酿酒酵母，将其投入到生产中以提高葡萄酒的风味和经济价值，并进一步探索利用基因工程技术改造微生物以有效利用纤维素的可行性方案，为人类社会的可持续发展做出贡献。结果表明，外源基因在酿酒酵母菌中实现了分泌表达，但是外源蛋白的分子量约100kD较bgln理论值92kD偏大，且没有检测到酶活，这可能和外源蛋白未被正确糖基化有关。 白藜芦醇是一种重要的植物抗毒素，具有多种医疗保健作用。白藜芦醇合酶(resveratrol synthase，简称RS)是合成白藜芦醇的关键酶。 在课题组成功构建了含花生RS基因的重组毕赤酵母GS115基础上，本研究筛选出能表达外源蛋白的毕赤酵母菌株。诱导表达后取重组酵母的发酵液经SDS．PAGE检测，结果显示：重组酵母发酵液在45kD和100kD附近位置明显增加了两条表达量较高的蛋白带，与RS的理论分子量接近，初步判断可能是外源蛋白；对发酵条件做了初步的优化以提高蛋白的表达，确定其最适发酵条件为：选用BMGY1BMMY培养基、pH值6.0、初始诱导时菌液浓度为OD<,600>=10、诱导时间96h左右、甲醇诱导浓度1％；并对发酵液进行了部分纯化，为下一步酶活的检测乃至利用毕赤酵母大规模生产白藜芦醇合酶打下了良好的基础。