【摘 要】
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该文利用启动子探针型载体pSUPV4直接在大肠杆菌中克隆类产碱假单胞菌（Ps eudomonas pseudoalcaligenes）基因启动子片段,获得具有强启动子的重组子pPA7.对PA7片段的序列分析发
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该文利用启动子探针型载体pSUPV4直接在大肠杆菌中克隆类产碱假单胞菌（Ps eudomonas pseudoalcaligenes）基因启动子片段,获得具有强启动子的重组子pPA7.对PA7片段的序列分析发现其距5端931bp-1091bp处具有原核生物典型基因启动子的保守结构-10区和-35区,以及翻译必需的SD序列和翻译起始位点等.对PA7片段进行southern杂交鉴定证明该片段来自于类产碱假单胞菌基因组且可能以单拷贝存在.PA7片段与其它重组子斑点杂交显示其与这8个重组子具有一定同源性.分别设计正向引物FPPA1、FPPA2,反向引物RPPA1、RPPA2对PA7片段进行PCR次克隆后定向连接到pSUPV4的多克隆位点区并保证阅读框不变,得到次克隆重组子pPA7-1、pPA7-2、pPA7-3,插入片段分别为1034bp、221bp、356bp.
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