论文部分内容阅读
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是痴呆症中一种中枢神经退行性和致命性疾病,主要发病于老年人中,常见临床症状表现为认知障碍、失忆、失眠和躁动等。同时由于全球人口老龄化加剧,该疾病己达到流行病的程度,带来了严重的社会和经济负担。到目前为止,关于AD的发病机制的假说有很多种,且并未统一,但在众多的假说当中,受到广泛认同的主要有p-淀粉样蛋白假说和胆碱能假说。这两种假说都认为AD的形成与乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase, AChE)有密切联系。因此,目前国际上治疗AD的有效手段主要是通过用药物抑制AD病人脑内AChE的活性,以间接达到增加脑内乙酰胆碱(Acetylcholine, ACh)的含量的目的。由此可见,对于乙酰胆碱酯酶抑制剂(Acetylcholinesterase inhibitor, AChEI)的研究显得尤为重要。迄今为止,研究者们已经从植物中筛选出几种有效的AChEI,如石杉碱甲、加兰他敏、毒扁豆碱等。这也提示我们,可以从植物药中筛选出具有抗AChE活性的潜在药物。酸枣仁是中南亚地区应用最广泛的药材之一,主要化学活性成分为黄酮、酸枣仁皂苷及生物碱等。大量研究表明其具有镇静催眠、抗焦虑、抗惊厥的功效,但其鲜少用于AD的治疗。近年来的研究发现酸枣仁中的活性成分对与AD有关的中枢神经系统如递质、受体等有着明显的影响作用,但关于酸枣仁中抗AChE的活性成分却鲜有报道。因此,本文针对酸枣仁抑制AChE活性的作刚进行了研究。首先,优化和改进了酸枣仁活性成分的HPLC测定方法和AChE活性测定方法,确定了各种必需的参数,为从酸枣仁中筛选AChEI提供了实验条件,奠定了筛选基础。其次,对酸枣仁中有效成分的提取分离条件进行了优化,确定了酸枣仁有效成分的最佳提取方法为：70%乙醇,料液比1：30,超声提取50min,提取两次。最后,对酸枣仁抗AChE活性进行了测试,确定酸枣仁具有抑制AChE活性的作用,并从中筛选出对AChE活性具有抑制作用的两个化合物,通过结合GC-MS、13C-NMR、1H-NMR等现代波谱光谱技术,参照相关文献及与标准品谱图的对比鉴定为亚油酸和油酸,IC50值分别为18.17±1.86和12.01±1.15μg·mL-1。本文的研究工作首次证明了酸枣仁具有抑制乙酰胆碱酯酶活性的作用,并从酸枣仁中筛选出了两个具有AChE抑制活性的物质,虽然其只显示了中等活性的AChE抑制作用,但这是首次确定这两个物质对AChE的抑制作用,也是首次揭示了酸枣仁抑制AChE(?)舌性的原因,扩展了酸枣仁的药用范围。我们的这一工作不仅为寻找治疗AD的新药提供了先导化合物,同时对于开发我国丰富的中药材宝库也具有重要意义。